| 查看: 955 | 回复: 13 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
bluesun5198银虫 (小有名气)
|
[求助]
AFLP选扩弥散，无很明显主带
|
||
|
做基因组DNA, AFLP引物筛选，第一张图是预扩增琼脂糖检测结果，第一排是我的预扩产物（下面是帮人带的样）60V 1h， 1%的胶，没注意显色剂Gelred和胶的比例，故跑的不是很好。（酶切连接产物没有稀释直接做的预扩） 后面两张都是同一块选扩的胶，一个是正常曝光，另一个是过曝光的，由于点样孔漏了，故只有前两排孔比较完整。3%的胶，70V 50分钟捡的，感觉选扩的引物没有一个能用的，不想上聚丙酰胺凝胶了，想直接跑荧光了。（选扩引物是师姐留下的，时间有点久，溶液-20大概放了1年了，不知道还能用不） 求高人指点，是我选扩体系的问题，还是引物的问题，还是说我的预扩出问题了。可以直接上荧光不？关键荧光引物贵啊。求指点啊  dell 2012-12-27 13hr 55min52(2) LY6 L1 L2 L24 L25 H21 H20.jpg  dell 2012-12-31 14hr 09min选扩1.jpg  dell 2012-12-31 14hr 13min过曝光.jpg [ Last edited by bluesun5198 on 2013-1-3 at 23:00 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有156人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
zhangyonghu
木虫 (小有名气)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 2123.1
- 散金: 8
- 帖子: 229
- 在线: 142.4小时
- 虫号: 1125036
- 注册: 2010-10-17
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
|
我现在是一点进展也没有啊 欲扩在750那有一条明显的主带，向下弥散到200 选扩点样孔那特别黑，在往下有点弥散 我的引物是新稀释的 你能把你的步骤、体系和程序发到我的邮箱么：zhangyonghu0815@126.com 谢谢 我看看，是不是我的操作过程有什么问题了 |
12楼2013-03-05 19:28:52
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
bluesun5198: 金币+10, ★有帮助 2013-01-04 15:52:29
感谢参与，应助指数 +1
bluesun5198: 金币+10, ★有帮助 2013-01-04 15:52:29
| 建议还是跑聚丙烯酰胺凝胶电泳，我觉得引物没问题，就是带没跑开。另外，上样量，胶浓，电泳电压，时间都需要你自己摸索优化。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
bluesun51982楼2013-01-04 09:33:35
3楼2013-01-04 11:21:17
bluesun5198
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 246.4
- 散金: 150
- 红花: 7
- 帖子: 56
- 在线: 56.9小时
- 虫号: 1174774
- 注册: 2010-12-21
- 专业: 观赏园艺学
4楼2013-01-04 15:51:09