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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于半定量内参的调制
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 关于半定量内参的调制

各位大侠，请教一个问题，做半定量PCR时是一定要调节模板的cDNA浓度至内参亮度一致吗？还可以有其他的调亮度的方法吗？比如说调循环数。或者不调可以不？我在做时，将相对较暗的条带的样品cDNA浓度到比较亮条带样品浓度的4倍时条带依然相对暗啊。求解释，求经验，求方法。附图，图中的暗条带就是已经将cDNA浓度调到平常的4倍了。

2012.12.14内参基因的检测Os18SrRNA（0hR-7dR）.jpg
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1楼 2012-12-22 12:04:38
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圈圈媛媛

铁虫 (初入文坛)
★
zmj521good(金币+1): 谢谢参与
是CDNA纯度问题么？
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9楼2013-01-05 19:14:15
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userhung

禁虫 (文学泰斗)
★ ★
zmj521good(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 热心的虫子！ 2012-12-22 21:38:29
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3614646
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1427387
http://www.dxy.cn/bbs/thread/5568971#5568971
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-JLYJ201101006.htm
http://www.soudoc.com/bbs/thread-9088009-1-1.html
http://www.dxy.cn/bbs/thread/3760104#3760104
http://ask.bbioo.com/ask/show-3157.html
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1006496
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2楼2012-12-22 12:25:51
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 圈圈媛媛 at 2013-01-05 19:14:15
是CDNA纯度问题么？

应该不是吧，我都是用1微克的RNA反转的cDNA。
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10楼2013-01-07 09:22:19
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