| 查看: 659 | 回复: 3 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
半定量试验中内参18S问题
|
|||
|
麻烦问下在RNA反转录中使用random与oligo引物各有什么优缺点？ 本人在做半定量PCR时是选用18S作为内参，那为了获得18S的cDNA，在反转录时应该是使用random引物吧？ 但在反转录时我同样使用了oligo引物，后采用18S特异引物扩增，竟然扩增出了我所要的片段，只是扩增出来的条带亮度比我的目的基因特异扩增条带亮度小，这该如何解释？？多谢！ 曾经以为是RNA中有DNA污染，但后来试验证明应该不是，不知如何是好？ 我RNA样品原来是用Oligo-dT引物反转录的，3组样品均得到了自己的目的基因，其中B,C样品有18S条带，A样品无。 今天又使用同样的A,B,C样品RNA，使用随机引物反转录，同样均得到了自己的目的基因，但是18S条带出现情况却不和上面的一致，A，C样品有18S条带，B样品却没有无。 通过A,B样品的两种引物反转录情况，这应该可以得出不是由于DNA污染所致吧，不然两次反转录应该都产生条带才对。 实在纳闷！！！！望高人指点！ |
回复此楼» 猜你喜欢
化学工程321分求调剂
已经有11人回复
-
材料专硕326求调剂
已经有5人回复
-
东南大学364求调剂
已经有5人回复
-
国自科面上基金字体
已经有7人回复
-
药学383 求调剂
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有5人回复
-
085601求调剂
已经有3人回复
-
302求调剂
已经有5人回复
-
考研化学学硕调剂，一志愿985
已经有5人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有4人回复
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
2楼2009-07-10 11:28:43
3楼2009-07-11 14:59:43
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
4楼2009-07-11 15:17:24
