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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)


[交流] 关于半定量内参的调制

各位大侠,请教一个问题,做半定量PCR时是一定要调节模板的cDNA浓度至内参亮度一致吗?还可以有其他的调亮度的方法吗?比如说调循环数。或者不调可以不?我在做时,将相对较暗的条带的样品cDNA浓度到比较亮条带样品浓度的4倍时条带依然相对暗啊。求解释,求经验,求方法。附图,图中的暗条带就是已经将cDNA浓度调到平常的4倍了。

2012.12.14内参基因的检测Os18SrRNA(0hR-7dR).jpg
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zmj521good

铁杆木虫 (小有名气)


引用回帖:
9楼: Originally posted by 圈圈媛媛 at 2013-01-05 19:14:15
是CDNA纯度问题么?

应该不是吧,我都是用1微克的RNA反转的cDNA。
10楼2013-01-07 09:22:19
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