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刘夏1985

金虫 (小有名气)

[交流] 硅胶分离时跑板的展开剂的选择 已有12人参与

本人在用硅胶柱进行分离天然化合物,在洗到氯仿:甲醇1:1时,用展开剂氯仿:甲醇1:1或氯仿:甲醇1:3都跑不出板来,都是一条线,或都是一个长点像是展不开,无法进行合并成分,请问大家我该怎 么办啊,如果换别的种类的展开剂,我可如何是好啊!!!!!!!!!!
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向文非的师妹

新虫 (小有名气)


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极性太大的容易拖,可能是带糖的或含比较多羟基,加水有效果,氯甲系统中氯仿比例大了水不好溶,要注意。我最近也在分大极性部位,开始根本看不到点,我不管三七二十一先用硅胶走了个梯度,划段以后有些还是看到点了,现在拿到一个是带糖的。这部分分起来是比较艰难的,但是还是分得出来,加油哈。
11楼2013-10-09 23:38:38
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kawazoe

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
必须用3相,当氯仿跟甲醇在3比1以后就要开始加水,水的最低的溶度是氯仿甲醇水 6.5:1:0.1    二氯甲烷甲醇水11.5:1:0.1  所以3比1过后可以用2:1:0.1----------1:1:0.2洗脱 基本可以成点,该出来的都会出来,除非个别类型的生物碱会粘在柱子上
14楼2013-10-18 20:08:20
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向文非的师妹

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by 眼线笑了 at 2013-10-18 11:56:40
请问你划完段之后各段点板情况怎么样呢?成点性好么?之后又是怎么处理的呢?我现在也在分大极性部分,分完段之后点板要么是一条线,要么有模糊的一个点,已经试过很多种展开剂了...

拖得也可能是背景杂质,先上反相看看,不行就是凝胶,这两种反复用。

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15楼2013-10-24 05:57:03
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普通回帖

lavenz

新虫 (正式写手)

★ ★
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中药2000: 金币+1, 谢谢 2012-12-18 16:35:03
可以尝试三相体系,加水,你这东西极性很大诶。要按我以前实验室基本就不分了
2楼2012-12-18 10:35:50
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achang-sh

金虫 (小有名气)

★ ★
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中药2000: 金币+1, 谢谢 2012-12-18 16:35:08
是不是点样量太大了?合并大概看一下就可以了,不用太清楚。不行试试反相板。
3楼2012-12-18 11:33:51
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刘夏1985

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lavenz at 2012-12-18 10:35:50
可以尝试三相体系,加水,你这东西极性很大诶。要按我以前实验室基本就不分了

我的梯度分的太大了,各个梯度不是太细,现在才发现,愁啊,怎么办啊
4楼2012-12-18 11:49:15
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ly6154

铜虫 (初入文坛)

★ ★
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xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-20 19:51:30
氯仿和水好像是不溶的·····加大甲醇的量试一下······
5楼2012-12-19 14:33:21
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suifeng259

铜虫 (小有名气)

★ ★
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xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-20 19:51:33
展开剂:氯仿甲醇水,或者正丁醇乙酸水;应该会有所改善

或者是全部合并,换一种填料来分,比如大孔树脂,MCI,或者反向硅胶

相关的展开剂比例和填料型号可以在课本上或者是文献中找到
6楼2012-12-20 18:03:08
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swaucq

金虫 (正式写手)


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你那个已经极性很大了,而且可能还有拖尾。氯仿甲醇体系加酸作为展层剂试试。如楼上所说,正相柱分大极性有难度,合并换反相柱试试。
不卑不亢
7楼2012-12-20 22:32:54
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匿名

用户注销 (正式写手)


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本帖仅楼主可见
8楼2012-12-29 00:10:05
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wanglibo66

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
要使用三相展开系统,比如氯仿:甲醇:水=6:4:1,7:3:1或者极性更大的,但在配展开剂的时候要注意分层的问题,有的系统不分层可以直接用,分层的话要静置之后再用,因为氯仿密度大,所以要用下层溶剂展开。希望对你有帮助。
9楼2013-04-01 08:05:14
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gaoyanga

银虫 (小有名气)


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我实验室一位同学也有这种状况,不太好分
10楼2013-07-29 20:05:10
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