应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 带GFP的重组表达载体，GFP蛋白会不会影响目的基因表达的蛋白？
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
211/1返回列表
查看: 6750  |  回复: 20
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

natureandsci

金虫 (小有名气)

[交流] 带GFP的重组表达载体，GFP蛋白会不会影响目的基因表达的蛋白？

在用EGFP质粒连接目的基因构建重组表达质粒研究某基因的功能时，GFP蛋白会不会影响目的基因表达的蛋白的结构和功能？或者影响有多大？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2012-12-16 16:59:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

pennchem

专家顾问 (正式写手)
★ ★ ★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-17 15:29:43
（1）最好的办法是纯化出来，做活性检测对比，这样最直接
（2）否则加足够长的linker，做一个实验把GFP放在N-端，另一个放在C-端，再做GFP作为阴性的对照
（3）有的GPF是可以形成多聚体的，如果是这样的质粒，需要做一些点突变，这样就可以得到单体的GFP，依然有荧光。
赞一下(5人) 回复此楼
10楼2012-12-17 10:02:26
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
flag肯定会影响目的蛋白的一些性质，但可以忽略其影响。标签要连载目的蛋白的C端。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2012-12-17 09:45:04
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

sarah-miao

银虫 (正式写手)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
应该不会，我也在做这个，实验设计初期就是想通过GFP来检测基因表达的，所以影响不会很大，但是之前在做细胞系的时候想到加个报告基因，但是老板说因为要建立稳定的细胞系，所以加报告基因不好，然后就是传统的RT，WB检测了
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-16 21:38:57
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1514132

至尊木虫 (著名写手)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
应该是没什么事的

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-16 22:11:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

readytogo

荣誉版主 (文学泰斗)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
估计不会吧，有个师弟做这个
赞一下 回复此楼
4楼2012-12-16 22:13:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lostdipper

新虫 (初入文坛)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
有的蛋白脸上后会影响蛋白折叠从而影响功能的
赞一下 回复此楼
6楼2012-12-16 22:35:41
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
这个没有人做过研究，楼主可以做个实验试一下，没准可以发文章呢
赞一下 回复此楼
12楼2012-12-18 19:41:04
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hemabaobao

铁杆木虫 (正式写手)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
距离太紧肯定会影响

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
13楼2012-12-19 01:05:52
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuding6

木虫 (小有名气)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
凡事都要去实践了才能知道结果
赞一下 回复此楼
14楼2012-12-19 10:47:10
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
融合表达一般会有一些影响，有些表达更高，有些表达变低。
赞一下 回复此楼
16楼2013-08-02 10:29:09
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

珍真善美

新虫 (初入文坛)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
我也想知道这个问题，请问楼主最终怎么做的
赞一下 回复此楼
17楼2014-09-12 18:06:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yww2012

银虫 (小有名气)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
个人感觉10楼说的有道理，两种蛋白会不会相互影响，需看具体在什么样的条件下。
赞一下 回复此楼
18楼2014-09-18 11:08:59
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

查无此人lyp

新虫 (正式写手)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
应该是会影响的，毕竟GFP蛋白20多呢，不小
赞一下 回复此楼
19楼2015-03-20 10:38:02
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

moon流风

新虫 (初入文坛)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
有可能。因为GFP有20多kd。确定会不会有影响，做互补实验。
赞一下 回复此楼
20楼2015-05-06 15:34:55
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ddtao

新虫 (小有名气)
★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
建议用Polycysteine-dendritic poly(His,Arg)1:5试一试
http://www.novel-polylysine.com/main/home/htm.php?nowmenuid=2
huiyisu@126.com
赞一下 回复此楼
21楼2016-04-02 12:50:20
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
yaoyao1455楼
2012-12-16 22:17   回复  
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
159290684508楼
2012-12-17 09:54   回复  
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
xiaofuyu9楼
2012-12-17 09:56   回复  
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
wgatssd11楼
2012-12-17 10:04   回复  
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
zhanqgao15楼
2013-05-07 09:04   回复  
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 natureandsci 的主题更新
211/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭