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金虫 (小有名气)

[交流] 带GFP的重组表达载体，GFP蛋白会不会影响目的基因表达的蛋白？

在用EGFP质粒连接目的基因构建重组表达质粒研究某基因的功能时，GFP蛋白会不会影响目的基因表达的蛋白的结构和功能？或者影响有多大？

1楼 2012-12-16 16:59:47

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专家顾问 (正式写手)

★ ★ ★
natureandsci(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-17 15:29:43

（1）最好的办法是纯化出来，做活性检测对比，这样最直接
（2）否则加足够长的linker，做一个实验把GFP放在N-端，另一个放在C-端，再做GFP作为阴性的对照
（3）有的GPF是可以形成多聚体的，如果是这样的质粒，需要做一些点突变，这样就可以得到单体的GFP，依然有荧光。

10楼2012-12-17 10:02:26

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