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竹林里的小蛇

银虫 (小有名气)

[交流] sds-page速度很慢 已有7人参与

刚开始跑双向电泳,做第二向的SDS-PAGE时电泳速度很慢,电流设为30mA,分离胶浓度12%,文献上说6到7小时就完成了,可是我6个小时才跑了不到一半的路程,大家说说这是个神马情况啊

[ Last edited by 竹林里的小蛇 on 2012-12-15 at 19:10 ]
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wchuangqi

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-12-16 07:17:05
这得看你的胶是多大的吧。我的一半跑12个小时,140伏
天道酬勤
2楼2012-12-15 23:34:40
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

缓冲液的问题?
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
3楼2012-12-15 23:57:36
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wizardfan: 金币+1, 谢谢分享经验 2012-12-16 07:17:38
电泳是速度和胶的大小、厚度都有关系。文献上说的时间只能是参考。一般大胶跑第二向都是过夜的。
4楼2012-12-16 01:10:57
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竹林里的小蛇

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wchuangqi at 2012-12-15 23:34:40
这得看你的胶是多大的吧。我的一半跑12个小时,140伏

我的是大胶,用的是BIO-RAD proteanⅡXL cell 电泳系统,胶长度约为18x19cm。
5楼2012-12-16 13:13:15
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yj279685695

银虫 (小有名气)

之前我们实验室做western时也出现过一次问题,后来找了很久的原因才知道是一种试剂弄错了,所以你应该去看看是否有什么试剂是搞混了,或者全部换成新的进口试剂重新配置,我很怀疑这个原因
东临碣石,以观沧海
6楼2012-12-16 15:35:59
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twisty

木虫 (正式写手)

newer


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用新配的缓冲液再试试。
兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
7楼2012-12-18 09:16:24
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food8291

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
恒功率,跑完就好了,时间长点无所谓
8楼2012-12-18 15:24:39
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DBWJ

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电泳液是新配的吗?如果不是就换个电泳液看看,以前我用旧的跑电泳就慢,后来换个新的就好了。
还有就是你看电泳液是不是完全接触上电极丝?接触不好的话也慢。
你胶槽看看是不是漏液?漏液的话就会使电极丝接触的电泳液变少,电泳时间就长
9楼2013-05-30 09:32:31
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