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skzoubo

木虫 (正式写手)

[求助] 6孔细胞培养板总有一个角落的细胞都死了

最近做细胞实验,采用6孔板养细胞,结果发现三天后每个孔的右下方都有一大片细胞是死的(而平面与竖面相接的地方细胞是活的),我毎孔加了两毫升培养基,每天都换液的。试了Greiner 和康宁的板子,都有这么个问题,用细胞瓶就没有这种现象,到底是什么原因呢,不知道有没有人遇到过这么个问题。
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人是追求幸福的存在
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skzoubo

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by peterozmo at 2012-12-08 18:02:55
是不是你换液的时候打枪打得太快了?把每个孔的那个区域的细胞都冲下来了?

应该不是这个原因
人是追求幸福的存在
6楼2012-12-17 15:11:14
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skzoubo

木虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by yeyu541200 at 2012-12-17 09:23:59
我也出现过这种情况,不过我的六孔板就一个空的正上偏左的位置,每回都是那个空的那个地,我怀疑可能是操作习惯的事,因为我们换了板,还是那样,你要不让你同学试试,别告诉他你怎么做的。   祝你成功!!!

谢谢,也许是这么个情况
人是追求幸福的存在
7楼2012-12-17 15:13:13
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skzoubo

木虫 (正式写手)

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5楼: Originally posted by western虫 at 2012-12-17 10:08:50
遇到过,至今不明原因

遇到这种情况,那实验怎么做呢
人是追求幸福的存在
8楼2012-12-17 15:13:40
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skzoubo

木虫 (正式写手)

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9楼: Originally posted by western虫 at 2012-12-17 15:38:32
出现这种情况没法做实验,还没加药呢,部分细胞像药物处理了一样。能找出原因就好了

哦,那可以直接用培养瓶做药物处理么,貌似我见过有直接用瓶子做的~
人是追求幸福的存在
10楼2012-12-17 19:23:58
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skzoubo

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
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12楼: Originally posted by yeyu541200 at 2012-12-18 08:50:58
可以用瓶子直接做,瓶子和板的根本区别是培养细胞的数量,一个板比一个瓶子多,再就是板可以做梯度比较方便。细胞瓶比较麻烦,但可以再荧光显微镜下观察!!!

再试一次,如果不行的话就换瓶子做
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14楼2012-12-18 15:27:13
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木虫 (正式写手)

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13楼: Originally posted by liyangmiscap at 2012-12-18 13:55:12
楼主换液的时候是用移液枪吸出的吗?是否是在吸出废液的时候将细胞吸出来了呢?

是用枪吸的呢,我养的是HepG2, 贴壁能力挺强的,用枪一般是吸不出来的吧。细胞死的地方都是我没有用枪吸的地方,我怀疑是洗得太干,我吸液体时是把板子斜着的,可能是那个角落的细胞缺水导致死亡
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15楼2012-12-18 15:31:17
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木虫 (正式写手)

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16楼: Originally posted by liyangmiscap at 2012-12-18 16:41:22
我也养过这种细胞,生命力还是很顽强的,之前铺板使用的是96孔板,换液是直接甩板,没用移液枪。六孔板铺板容易不均匀,楼主铺完板在显微镜下看看是否是铺板不均匀的原因...

我昨天晚上铺的板,今天看了一下还好,目前还没有出现一个区域的细胞都死的现象
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18楼2012-12-18 20:49:48
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引用回帖:
4楼: Originally posted by yeyu541200 at 2012-12-17 09:23:59
我也出现过这种情况,不过我的六孔板就一个空的正上偏左的位置,每回都是那个空的那个地,我怀疑可能是操作习惯的事,因为我们换了板,还是那样,你要不让你同学试试,别告诉他你怎么做的。   祝你成功!!!

是操作习惯的问题,角落的细胞缺水导致死亡。孔里的液体不能吸得太干
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20楼2013-01-04 21:12:16
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5楼: Originally posted by western虫 at 2012-12-17 10:08:50
遇到过,至今不明原因

角落的细胞是缺水导致死亡的。现在动作快一点,尽量不让细胞缺水,试了几次,都没有出现之前的问题了
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21楼2013-01-04 21:14:32
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