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左岸的雅各宾

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物有条带，原液没有条带？（我不久前申请的号，没多少金币。大家行行好吧。）

最左边是maker ，然后是4个原液，然后4个分别是原液相对应的PCR产物。
1、PCR产物的第三条是亮的。但其原液没有？
2、在第6条maker的位置有一排很黑的。什么原因或什么物质？

Untitled 1.jpg
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1楼 2012-12-07 19:20:43
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dwc326

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同意楼上观点，那个黑带位置是Loading Buffer中的溴酚蓝的位置，楼主下次跑胶时比较一下位置就知道了。
至于条带么，跑出来就行，模板没有条带，那是浓度太低，但是PCR是高敏感的，即使你看不见的浓度也能很容易的P出来。
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12楼2012-12-11 17:03:13
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hxswdl

至尊木虫 (文坛精英)

Tortoise

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
左岸的雅各宾: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-12 11:53:05
原液是模板？看不到不代表没有！那条黑带会不会是拍照时凝胶成像仪底板不干净引起的？挪动胶再照一张试试！如果是溴酚蓝应该每个泳道都有。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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Dripping Concentrated!!energetic and active！
2楼2012-12-07 20:04:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原液如果是指模板本来就应该看不见的。PCR的模板浓度很低，如果跑胶能看到模板的话说明PCR模板加多了。照片发黑的应该是溴酚蓝指示剂。
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3楼2012-12-08 09:45:54
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左岸的雅各宾

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-08 09:45:54
原液如果是指模板本来就应该看不见的。PCR的模板浓度很低，如果跑胶能看到模板的话说明PCR模板加多了。照片发黑的应该是溴酚蓝指示剂。

原液是模板。我是先提出来，marker的左边四个就是的，每孔1ul的指示剂加5ul提取液。再用2ul的原液跑跑PCR，25体系的，再右边四个就是。正常情况下模板在第一条 maker上面一点，不知道这次为什么没有。
还有，指示剂按道理应该至少在最后一条marker那里啊。
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4楼2012-12-08 13:43:40
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