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毛阿毛

金虫 (正式写手)

[求助] 体外抗氧化指标

体外抗氧化指标 主要可分为
1  自由基的猝灭
2 还原力的衡量
3 金属离子的螯合 等等

那这些指标之间的相关性如何呢? 我最近在做抗氧化肽,但是它还原力效果还不错,可是DPPH自由基的清除率几乎为0, 这是什么问题?
DPPH是新配的 用95%乙醇配置, 避光储存于冰箱中, 每次测定前,酶解液也经过稀释,并无沉淀  但是 吸光值还是很高  阿门 这到底是为什么?  问题是不少文献里 都说DPPH是个比较灵敏的指标, 想不通啊 想不通  求指导~~~~(>_<~~~~

[ Last edited by 毛阿毛 on 2012-11-28 at 14:24 ]
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may6781

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lovibond: 金币+1, 鼓励应助 2012-11-29 09:59:09
先看看抗氧化肽加入到DPPH溶液中后,紫色是否减弱或消退,如果发生,说明具有清除DPPH自由基的能力;但吸光值仍然很大,可能与样品的浑浊度有关或者样品本身色泽过深有关。
2楼2012-11-28 16:35:36
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普通回帖

毛阿毛

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by may6781 at 2012-11-28 16:35:36
先看看抗氧化肽加入到DPPH溶液中后,紫色是否减弱或消退,如果发生,说明具有清除DPPH自由基的能力;但吸光值仍然很大,可能与样品的浑浊度有关或者样品本身色泽过深有关。

嗯 我肉眼看上去 颜色 有变潜的呢  样品本身没啥颜色诶 至于浑浊度 该怎么办呢?
3楼2012-12-01 15:14:42
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may6781

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-12-03 19:37:11
离心或者过滤,等样品完全澄清
4楼2012-12-01 23:03:00
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linsunche

至尊木虫 (职业作家)

林霸

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-12-03 19:37:04
具體?碚f,若操作正確還有此現象的話, 表示該樣品無法提供 [H] 質子.
5楼2012-12-02 11:21:41
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毛阿毛

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by linsunche at 2012-12-02 11:21:41
具體?碚f,若操作正確還有此現象的話, 表示該樣品無法提供  質子.

问题是  很多文献都 有这个效果  中外文都有  让我不得不怀疑自己
6楼2012-12-04 08:49:34
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ylshao_hb

禁虫 (小有名气)

hsd3521: 应助指数+1 2012-12-04 19:02:36
本帖内容被屏蔽

7楼2012-12-04 11:17:02
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linsunche

至尊木虫 (职业作家)

林霸

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-12-04 19:03:00
hsd3521: 回帖置顶 2012-12-04 19:03:09
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8楼2012-12-04 12:07:01
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ylshao_hb

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

9楼2012-12-05 07:53:30
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毛阿毛

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by linsunche at 2012-12-04 12:07:01
抗氧化肽為植物或動物蛋白质,具有抗氧化活性的小分子肽,又被称为外源性抗氧化肽;它介于氨基酸和蛋白质之间,是一种相对分子质量很小但活性很高的短肽,这些短肽一般含有两个到十几个氨基酸,其相对分子质量一般小于6 0 ...

昨儿个 又测了遍,所有药品都是新配的,加样品的颜色变成了偏红色,不再是紫色,吸光值竟然比空白还大,也就是说在DPPH方面,它不仅没有抗氧化性,反而会氧化? 还原力证明有一些效果,但酶解时间梯度几乎观察不到
我的样品 是制的明胶, 现在怀疑:
DPPH 没效果:
1: 蛋白酶没有切动它  (打算用胃蛋白酶提取的样品 来酶解试试,这个跑过电泳 分子量已相对来说较小),打算测个水解度看看
2:就像你说的 它没有清除DPPH的能力,这会不会跟它的氨基酸组成有关呢?(主要为甘氨酸  和 羟脯氨酸类)
3:如果对DPPH没效果,那对别的自由基会有效果吗?还是不太明白这些指标的机理。
酶解时间来不开梯度:
1:加酶量过大,以致于1个小时就已全部酶解完了(打算先做一个酶活梯度的单因素 试试)
2:酶解时间可能应该大大缩短

别的还有神马因素 会造成这种悲催的结果啊????
10楼2012-12-05 10:18:33
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