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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 克隆载体可以直接转染进入细胞吗？
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

[交流] 克隆载体可以直接转染进入细胞吗？ 已有3人参与

弱弱的问一句，当我们只需要观察某个基因在RNA水平的作用，不需要它表达的时候，可以直接用克隆载体转染进入细胞吗？克隆载体可以直接转染吗？为什么？突然想到这个问题，大家帮忙解答一下。。。
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keepon
1楼 2012-11-27 20:19:54
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jiangyhai

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
当然不可以。克隆载体转入细胞因为缺少转录元件，所以要无法转录成mRNA。
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静心做事。
2楼2012-11-27 20:38:31
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiangyhai at 2012-11-27 20:38:31
当然不可以。克隆载体转入细胞因为缺少转录元件，所以要无法转录成mRNA。

那对于一个质粒，你怎么确定它是不是有转录元件呢？
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keepon
3楼2012-11-27 20:53:30
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luba

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以的吧，我转细胞的都是我自己克隆的载体啊，不过你那个载体应该要是能在哺乳动物里表达的载体，像pCDNA系列的。还要用去内毒素的质粒抽提试剂盒提一下。
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4楼2012-11-27 23:46:51
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)
这需要表达载体
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星陈代谢
5楼2012-11-28 08:34:43
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kx444555 at 2012-11-28 08:34:43
这需要表达载体

我不需要表达蛋白。。。所以不需要表达载体。。。
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keepon
6楼2012-11-28 08:36:27
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-27 20:53:30
那对于一个质粒，你怎么确定它是不是有转录元件呢？...

PCDNA是表达载体吧？？？
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keepon
7楼2012-11-28 08:36:52
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by luba at 2012-11-27 23:46:51
可以的吧，我转细胞的都是我自己克隆的载体啊，不过你那个载体应该要是能在哺乳动物里表达的载体，像pCDNA系列的。还要用去内毒素的质粒抽提试剂盒提一下。

你自己克隆的载体？什么载体？你说的pCDNA载体是表达载体。。。
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keepon
8楼2012-11-28 11:12:41
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-11-28 08:36:27
我不需要表达蛋白。。。所以不需要表达载体。。。...

表达蛋白和转录成RNA都需要表达载体，需要带有启动子才行
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星陈代谢
9楼2012-11-28 16:53:39
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by kx444555 at 2012-11-28 16:53:39
表达蛋白和转录成RNA都需要表达载体，需要带有启动子才行...

可是我是研究某个基因的3‘UTR呢？它本身是不表达的噻，而且我也只看它在RNA水平的功能呢。。。所以不需要也不要它表达。。
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keepon
10楼2012-11-28 19:51:34
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