版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4277)
>文献求助 (466)
>虫友互识 (375)
>导师招生 (365)
>考博 (203)
>博后之家 (182)
>硕博家园 (162)
>休闲灌水 (154)
>论文投稿 (131)
>基金申请 (94)
>考研 (72)
>招聘信息布告栏 (66)
>教师之家 (60)
>绿色求助(高悬赏) (47)
>公派出国 (46)
>找工作 (38)

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jiaolong11a

新虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 46 (小学生)
金币: 487.3
红花: 5
沙发: 1
帖子: 227
在线: 29.5小时
虫号: 1244690
注册: 2011-03-25
性别: MM
专业: 基因表达调控与表观遗传学

[求助] GST融合蛋白洗脱时洗脱不下来，怎么办

最近在做GST-pull down实验，gst 融合蛋白表达出来了，也挂柱了，但是用还原型谷胱甘肽洗脱时洗不下来，还都挂在beads上，

，不知怎么办了，我用的洗脱液是100mM谷胱甘肽，50mM的Tric-Hcl，PH8.0 ，求大神帮助，谢谢

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有141人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

中药TLC薄层用的展开剂用作过硅胶柱的洗脱剂效果不是很好为什么？该怎么办？已经有6人回复
目标物就是不能洗脱下来怎么办呀？？已经有18人回复
蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来已经有14人回复
为什么冲下来的东西在洗脱剂不好溶已经有11人回复
阳离子交换柱洗脱蛋白已经有8人回复
洗脱不下来，怎么办？已经有6人回复
用Sephadex G-100 上柱，上好后洗脱液流不出来，怎么办？？？已经有8人回复
SOS..用甲醇也洗脱不了的化合物在柱子上怎么取出来？已经有38人回复
等度洗脱7分左右出的峰不好，梯度洗脱7分的锋出在坡上啊怎么办？已经有10人回复
阴离子交换树脂上阴离子（十二烷基苯磺酸钠）不能洗脱下来已经有15人回复
【求助】急求！极性大孔上样丙酮洗脱不下来怎么办啊？已经有5人回复
【求助】每次洗脱时都会出现单向阀堵塞，怎么办？已经有5人回复
【求助】为啥我上柱后析出的固体溶不到洗脱液里了？？已经有6人回复
【求助】植化薄层板摸好洗脱条件后，上柱时洗脱液是否要稀释一倍（听别人说的，不知� 已经有19人回复
【求助/交流】Ni柱洗脱蛋白已经有6人回复
【求助】爬大板之后，产品从硅胶洗脱不理想怎么办？已经有13人回复
【求助】急急急：大孔树脂AB-8洗脱时流不动了--在线等已经有15人回复
【求助】固相萃取，吸附的物质就是洗脱不下来，怎么办已经有4人回复
【求助/交流】SP柱子纯化蛋白，蛋白结合后，用2M NacL都没有洗脱下来，该怎么办？已经有5人回复

多情总被无情扰。。。愁

1楼2012-11-27 10:26:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yongbo_liang

新虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 43 (小学生)
金币: 266.2
散金: 10
帖子: 114
在线: 52.5小时
虫号: 2009557
注册: 2012-09-18
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

个人感觉你的蛋白不是没有洗脱下来，而是沉淀在柱上面了。
建议，下次纯化的时候，把50mMTris，降到10-20mM，同时把PH提主高到8.5-9.0之间，还有上样量减少点。

3楼2012-11-27 14:20:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 jiaolong11a 的主题更新