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卖萌的御姐

新虫 (初入文坛)

[求助] 用Sephadex G-100 上柱,上好后洗脱液流不出来,怎么办??? 已有2人参与

RT,
Sephadex G-100溶胀48h后上柱,上的时候还挺好,底下流出液速度正常,但是全部上好后,底下就没有液体流出了,查了资料,觉得可能是没有脱气
第二次脱气以后上柱,等凝胶平衡以后还没上样,底下又不滴了!重复好几次都是这样
这是什么问题呢?有没有哪位遇到过类似问题啊???很着急的说~~~
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zhanglichao

木虫 (小有名气)

压力太大了吧
2楼2012-04-25 15:30:59
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qiaqia832

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
树树8013: 金币+2, 最近经常见到你,我已经认识你了。请继续关注食品板块。 2012-04-27 21:15:35
柱子底部有没有放一个滤纸片呢,是不是柱材把柱子口的纱网给堵住了,你用了恒流泵了没有,先别上样多跑几次试试,一般都会流的,还有你纯化的什么?缓冲溶液ph和浓度对不对,好好检查每一个细节
Alwayshave,alwayswill.@DK。http://weibo.com/1949078153/profile?topnav=1&wvr=5&user=1
3楼2012-04-25 15:54:03
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卖萌的御姐

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by qiaqia832 at 2012-04-25 15:54:03:
柱子底部有没有放一个滤纸片呢,是不是柱材把柱子口的纱网给堵住了,你用了恒流泵了没有,先别上样多跑几次试试,一般都会流的,还有你纯化的什么?缓冲溶液ph和浓度对不对,好好检查每一个细节

底部是用纱布垫着的,用恒流泵也不行,我纯化的是多糖,洗脱液用的蒸馏水,一般情况下流速应该有0.3-0.5ml/min才对啊,我的直接就不滴,不知道怎么回事
4楼2012-04-25 16:41:59
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行板如歌

金虫 (小有名气)

样品上柱之前过滤了没?没过滤很容易堵的。
5楼2012-04-26 09:53:17
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卖萌的御姐

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 行板如歌 at 2012-04-26 09:53:17:
样品上柱之前过滤了没?没过滤很容易堵的。

还没上样就已经流不动了
6楼2012-04-26 10:42:14
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双螺旋DNA

金虫 (正式写手)

★
树树8013: 金币+1, 谢谢交流,欢迎继续关注咱们自己的食品板块。 2012-04-29 11:55:57
如果不加样品 堵的话,那时柱子的原因(胶体或者系统),如果加样后 堵那就是样品的原因,可以考虑对样品预处理
7楼2012-04-26 12:22:27
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sharkey.XU

铜虫 (正式写手)

★
树树8013: 金币+1, 谢谢交流,欢迎继续关注咱们自己的食品板块。 2012-04-29 11:56:03
可能是 填料颗粒膨胀时间过长或者颗粒密度太大,有效空隙太小,易导致小柱堵塞;2种可能是发生化学反应,可能性小。总体,自制小柱要求比较高,极易失败。改进改进就好。
宁静以致远
8楼2012-04-28 09:06:44
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xjgf1215

新虫 (初入文坛)

我也是这种情况呢···咋回事儿呢?能请各位大侠帮忙啊,我的柱子是用乙醇过的时候很好,等用超纯水去醇味的时候底下就不流液体了,很慢很慢···几乎不流
9楼2013-05-28 22:09:14
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