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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 用Sephadex G-100 上柱，上好后洗脱液流不出来，怎么办？？？
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卖萌的御姐

新虫 (初入文坛)

[求助] 用Sephadex G-100 上柱，上好后洗脱液流不出来，怎么办？？？ 已有2人参与

RT,
Sephadex G-100溶胀48h后上柱，上的时候还挺好，底下流出液速度正常，但是全部上好后，底下就没有液体流出了，查了资料，觉得可能是没有脱气
第二次脱气以后上柱，等凝胶平衡以后还没上样，底下又不滴了！重复好几次都是这样
这是什么问题呢？有没有哪位遇到过类似问题啊？？？很着急的说~~~
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1楼 2012-04-25 15:24:30
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zhanglichao

木虫 (小有名气)
压力太大了吧
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2楼2012-04-25 15:30:59
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qiaqia832

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
树树8013: 金币+2, 最近经常见到你，我已经认识你了。请继续关注食品板块。 2012-04-27 21:15:35
柱子底部有没有放一个滤纸片呢，是不是柱材把柱子口的纱网给堵住了，你用了恒流泵了没有，先别上样多跑几次试试，一般都会流的，还有你纯化的什么？缓冲溶液ph和浓度对不对，好好检查每一个细节
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Alwayshave,alwayswill.@DK。http://weibo.com/1949078153/profile?topnav=1&wvr=5&user=1
3楼2012-04-25 15:54:03
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卖萌的御姐

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qiaqia832 at 2012-04-25 15:54:03:
柱子底部有没有放一个滤纸片呢，是不是柱材把柱子口的纱网给堵住了，你用了恒流泵了没有，先别上样多跑几次试试，一般都会流的，还有你纯化的什么？缓冲溶液ph和浓度对不对，好好检查每一个细节

底部是用纱布垫着的，用恒流泵也不行，我纯化的是多糖，洗脱液用的蒸馏水，一般情况下流速应该有0.3-0.5ml/min才对啊，我的直接就不滴，不知道怎么回事
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4楼2012-04-25 16:41:59
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行板如歌

金虫 (小有名气)
样品上柱之前过滤了没？没过滤很容易堵的。
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5楼2012-04-26 09:53:17
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卖萌的御姐

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 行板如歌 at 2012-04-26 09:53:17:
样品上柱之前过滤了没？没过滤很容易堵的。

还没上样就已经流不动了
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6楼2012-04-26 10:42:14
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双螺旋DNA

金虫 (正式写手)
★
树树8013: 金币+1, 谢谢交流，欢迎继续关注咱们自己的食品板块。 2012-04-29 11:55:57
如果不加样品 堵的话，那时柱子的原因（胶体或者系统），如果加样后 堵那就是样品的原因，可以考虑对样品预处理
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7楼2012-04-26 12:22:27
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sharkey.XU

铜虫 (正式写手)
★
树树8013: 金币+1, 谢谢交流，欢迎继续关注咱们自己的食品板块。 2012-04-29 11:56:03
可能是 填料颗粒膨胀时间过长或者颗粒密度太大，有效空隙太小，易导致小柱堵塞；2种可能是发生化学反应，可能性小。总体，自制小柱要求比较高，极易失败。改进改进就好。
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宁静以致远
8楼2012-04-28 09:06:44
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xjgf1215

新虫 (初入文坛)
我也是这种情况呢···咋回事儿呢？能请各位大侠帮忙啊，我的柱子是用乙醇过的时候很好，等用超纯水去醇味的时候底下就不流液体了，很慢很慢···几乎不流
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9楼2013-05-28 22:09:14
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