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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » AFLP的欲扩范围大
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)

[求助] AFLP的欲扩范围大

我最近做AFLP，DNA里含点蛋白质，用PSTI和MSEI双酶切，可是欲扩以后在750那有一条亮带，弥散的范围也偏大，是怎么回事
是不是蛋白质对酶切存在影响，怎么能把蛋白质除掉呢
这是我的欲扩的图

未命名.jpg
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1楼 2012-11-25 21:37:49
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zhangyonghu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by CXL19880406 at 2012-11-26 14:41:09
那需要检测一下你设计的引物的特异性了吧，弥散分子里偏大说明你PCR的时候片段大了，那应该是引物的问题了，根据酶切位点设计的接头引物和另一个引物通过vector检测一下特异性，另外PCR的退火温度可以适当调整一下 ...

谢谢，是退火温度太低了么？
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10楼2012-12-03 18:26:39
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liugs

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2012-11-26 06:42:21
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shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先把核酸质量搞上去先。核酸的OD值是多少？0  去蛋白的方法有多种：用蛋白酶K;用酚抽提;用试剂盒抽提。第三种最方便且毒性小。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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唯以一人治天下，不以天下奉一人。
3楼2012-11-26 07:25:36
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shucanwei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你是提植物的吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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唯以一人治天下，不以天下奉一人。
4楼2012-11-26 07:26:40
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