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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 转基因植物的筛选问题
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DandelionLS

铜虫 (初入文坛)

[求助] 转基因植物的筛选问题

用土壤农杆菌Ti质粒携带目的基因侵染植物，转基因的植物怎么筛选啊？
抗性基因是Kan，怎样设计Kan的浓度啊？
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1楼 2012-11-22 17:17:30
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回帖置顶 ( 共有1个 )

雄鹰飞翔

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

DandelionLS: 回帖置顶 2012-11-28 06:17:47
首先说明，Kan是不能用来筛选转基因植物的
其次，使用的农杆菌如AH109中，基本上都含有其它抗性基因，如潮霉素，大观霉素，除草剂等，可以用来筛选抗性植株
浓度，一般是中等偏上，不能太大，否则影响植株的生长
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8楼2012-11-27 10:12:26
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

pacer02

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
9楼2012-11-29 07:21:36
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zhoulubin

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Kan终浓度100mg/L
抗性筛选，PCR鉴定
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每个年龄都有其最应该做的事，但只有过了那个年龄自己才知道
3楼2012-11-22 19:34:15
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wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般硫酸卡那霉素可以用来筛选转基因拟南芥，含有2%蔗糖MS培养基中加入抗生素至终浓度25mg/L,正常培养，一般抗性苗为绿色，不抗的苗为黄色的。
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10楼2012-12-06 17:02:45
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普通回帖

haozixiaozhu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
设置浓度梯度，找到半致死浓度。
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2楼2012-11-22 19:33:30
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十比

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kan的品牌很重要，不同公司的差别很大，用sigma一般50左右应该可以。
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4楼2012-11-22 21:52:23
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张飞zhangfei

铜虫 (初入文坛)
用农杆菌侵染
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5楼2012-11-22 23:31:48
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wxf-er

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你浸染什么植物，查文献看已有的筛选设计
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自然
6楼2012-11-23 10:30:00
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脱水拂空

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要设计一个筛选抗生素浓度梯度  这是要的
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7楼2012-11-23 12:39:23
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