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xy656691

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

浓度梯度筛选吧。材料要多
11楼2012-12-10 22:34:13
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SD遗传

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

要看转的是什么植物,查下文献,设置下最高浓度和最低浓度,中间设梯度,找到对于野生植株的半致死浓度,就差不多是你要的筛选浓度了。
12楼2012-12-13 09:54:23
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lanqingkuo

木虫 (小有名气)

PCR鉴定一下就行了
战斗吧,朋友
13楼2012-12-13 20:34:37
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lw19850128

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

kan可以用,但一般来讲kan易受环境影响而分解,所以很多植物组培初筛的时候很不稳定,不过也不能一就而论。至于检测方法,太多了,楼上说的PCR检测目的基因很直接也很简单。
14楼2012-12-17 15:52:56
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songshande

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我的实验转基因植物就是用Kana筛选的,要确定筛选植株的Kana的最终浓度,可以做个梯度(10个),比如0,10,40,,60,80,,100,120,140等等,我用的浓度是100mg/L;用抗性板筛选出来的不一定都是转基因植株,因为有可能是突变了的,所以还要进行PCR鉴定
加油!!!!!!!
15楼2012-12-17 17:15:21
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 雄鹰飞翔 at 2012-11-27 10:12:26
首先说明,Kan是不能用来筛选转基因植物的
其次,使用的农杆菌如AH109中,基本上都含有其它抗性基因,如潮霉素,大观霉素,除草剂等,可以用来筛选抗性植株
浓度,一般是中等偏上,不能太大,否则影响植株的生长

AH109不是酵母吗?
16楼2012-12-21 21:15:54
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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by pacer02 at 2012-11-29 07:21:36
Kan可以筛选转基因植物,只是需要筛选的时间比较长,因为Kan是通过杀死叶绿体使植物白化致死,当然对不同的植物致死浓度可能不一样。对于拟南芥100100mg/L应该可以了,对于其它植物查一下文献应该可以找到。但请楼主 ...

你好,想请教一下关于潮霉素筛选拟南芥的问题。我用MS培养基筛选拟南芥,潮霉素的浓度25mg/l。现在培养10d了,叶子还很绿油油的,不过根系很短,有的感觉有根毛,当然比对照的根要短的多。想知道大家做筛选的时候,怎么区分的呢?是要等到没抗性的变黄吗?有抗性的拟南芥,一般根系是什么样的情况呢?
相信黎明不会失约,相信付出必有回报!
17楼2013-04-02 21:04:48
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abundant

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by pacer02 at 2012-11-29 07:21:36
Kan可以筛选转基因植物,只是需要筛选的时间比较长,因为Kan是通过杀死叶绿体使植物白化致死,当然对不同的植物致死浓度可能不一样。对于拟南芥100100mg/L应该可以了,对于其它植物查一下文献应该可以找到。但请楼主 ...

请问pMB2301可以用kan筛选么?
18楼2016-12-16 11:06:41
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Ailee桑卡娜

新虫 (小有名气)

用潮霉素吧,然后你去查一下它的作用浓度,设一个梯度

发自小木虫IOS客户端
19楼2016-12-20 11:14:19
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abundant

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by pacer02 at 2012-11-29 07:21:36
Kan可以筛选转基因植物,只是需要筛选的时间比较长,因为Kan是通过杀死叶绿体使植物白化致死,当然对不同的植物致死浓度可能不一样。对于拟南芥100100mg/L应该可以了,对于其它植物查一下文献应该可以找到。但请楼主 ...

pMB2301可以用kan筛选么?
20楼2016-12-23 17:17:37
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