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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 转基因植物的筛选问题
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xy656691

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

浓度梯度筛选吧。材料要多
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11楼2012-12-10 22:34:13
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SD遗传

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

要看转的是什么植物，查下文献，设置下最高浓度和最低浓度，中间设梯度，找到对于野生植株的半致死浓度，就差不多是你要的筛选浓度了。
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12楼2012-12-13 09:54:23
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lanqingkuo

木虫 (小有名气)
PCR鉴定一下就行了
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战斗吧，朋友
13楼2012-12-13 20:34:37
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lw19850128

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

kan可以用，但一般来讲kan易受环境影响而分解，所以很多植物组培初筛的时候很不稳定，不过也不能一就而论。至于检测方法，太多了，楼上说的PCR检测目的基因很直接也很简单。
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14楼2012-12-17 15:52:56
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songshande

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我的实验转基因植物就是用Kana筛选的，要确定筛选植株的Kana的最终浓度，可以做个梯度（10个），比如0,10,40,,60,80,,100，120,140等等，我用的浓度是100mg/L;用抗性板筛选出来的不一定都是转基因植株，因为有可能是突变了的，所以还要进行PCR鉴定
加油！！！！！！！
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15楼2012-12-17 17:15:21
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 雄鹰飞翔 at 2012-11-27 10:12:26
首先说明，Kan是不能用来筛选转基因植物的
其次，使用的农杆菌如AH109中，基本上都含有其它抗性基因，如潮霉素，大观霉素，除草剂等，可以用来筛选抗性植株
浓度，一般是中等偏上，不能太大，否则影响植株的生长

AH109不是酵母吗？
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16楼2012-12-21 21:15:54
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~春梦秋云~

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by pacer02 at 2012-11-29 07:21:36
Kan可以筛选转基因植物，只是需要筛选的时间比较长，因为Kan是通过杀死叶绿体使植物白化致死，当然对不同的植物致死浓度可能不一样。对于拟南芥100100mg/L应该可以了，对于其它植物查一下文献应该可以找到。但请楼主 ...

你好，想请教一下关于潮霉素筛选拟南芥的问题。我用MS培养基筛选拟南芥，潮霉素的浓度25mg/l。现在培养10d了，叶子还很绿油油的，不过根系很短，有的感觉有根毛，当然比对照的根要短的多。想知道大家做筛选的时候，怎么区分的呢？是要等到没抗性的变黄吗？有抗性的拟南芥，一般根系是什么样的情况呢？
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相信黎明不会失约，相信付出必有回报！
17楼2013-04-02 21:04:48
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abundant

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by pacer02 at 2012-11-29 07:21:36
Kan可以筛选转基因植物，只是需要筛选的时间比较长，因为Kan是通过杀死叶绿体使植物白化致死，当然对不同的植物致死浓度可能不一样。对于拟南芥100100mg/L应该可以了，对于其它植物查一下文献应该可以找到。但请楼主 ...

请问pMB2301可以用kan筛选么？
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18楼2016-12-16 11:06:41
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Ailee桑卡娜

新虫 (小有名气)
用潮霉素吧，然后你去查一下它的作用浓度，设一个梯度

发自小木虫IOS客户端
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19楼2016-12-20 11:14:19
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abundant

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by pacer02 at 2012-11-29 07:21:36
Kan可以筛选转基因植物，只是需要筛选的时间比较长，因为Kan是通过杀死叶绿体使植物白化致死，当然对不同的植物致死浓度可能不一样。对于拟南芥100100mg/L应该可以了，对于其它植物查一下文献应该可以找到。但请楼主 ...

pMB2301可以用kan筛选么？
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20楼2016-12-23 17:17:37
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