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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：在不破坏组蛋白结构的前提下，应该采用什么样的细胞裂解方法？
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：在不破坏组蛋白结构的前提下，应该采用什么样的细胞裂解方法？

如题：在不破坏组蛋白结构的前提下，应该采用什么样的细胞裂解方法？一定不能用SDS！！
求小木虫高人指点！！！
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1楼 2012-11-21 21:07:32
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
超声破碎，200W，4min两次。
或者机械microfluidics，破碎两次，buffer中加点甘油。
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5楼2012-11-22 10:59:35
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般是靠机械，比方说超声、玻璃珠什么的。具体条件要看你做的是什么物种。
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2楼2012-11-22 06:58:30
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-22 06:58:30
一般是靠机械，比方说超声、玻璃珠什么的。具体条件要看你做的是什么物种。

我用的是Hela细胞，想获得不破坏组蛋白结构的全细胞裂解液。您说的超声、玻璃珠能再具体点吗？一定要对核里的组蛋白没有影响哦---
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3楼2012-11-22 09:22:07
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)
我是学化学的，对生物的不大懂，请大侠说的具体点吧
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4楼2012-11-22 09:28:11
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)
那请问具体使用的是什么仪器啊？是不是专门的超声仪啊？我们这化学实验室里可能没有-----
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6楼2012-11-22 14:07:47
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gzj10_thu

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
高压破碎机
超声破碎仪

可以去找学生物的同学帮忙哈
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7楼2012-11-22 17:34:13
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gsli87

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
超声细胞破碎仪，缓冲液什么的你查查文献就有
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8楼2012-11-22 19:14:56
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)
谢谢大家，感激不尽啊
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9楼2012-11-22 19:53:25
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)
加甘油的作用是什么啊？看到文献上有先用低渗溶液得到细胞质提取液，然后用低盐的溶液悬浮细胞核，再逐滴加入高盐的溶液而得到核提取物的。这样可以吗？为什么低盐再加高盐就能得到核提取物？什么原理啊？大侠们，帮帮忙啦----小女子在此先谢过了哦---
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10楼2012-11-23 09:22:20
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