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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助:在不破坏组蛋白结构的前提下,应该采用什么样的细胞裂解方法?

如题:在不破坏组蛋白结构的前提下,应该采用什么样的细胞裂解方法?一定不能用SDS!!
求小木虫高人指点!!!
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
超声破碎,200W,4min两次。
或者机械microfluidics,破碎两次,buffer中加点甘油。
5楼2012-11-22 10:59:35
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般是靠机械,比方说超声、玻璃珠什么的。具体条件要看你做的是什么物种。
2楼2012-11-22 06:58:30
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-22 06:58:30
一般是靠机械,比方说超声、玻璃珠什么的。具体条件要看你做的是什么物种。

我用的是Hela细胞,想获得不破坏组蛋白结构的全细胞裂解液。您说的超声、玻璃珠能再具体点吗?一定要对核里的组蛋白没有影响哦---
3楼2012-11-22 09:22:07
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

我是学化学的,对生物的不大懂,请大侠说的具体点吧
4楼2012-11-22 09:28:11
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

那请问具体使用的是什么仪器啊?是不是专门的超声仪啊?我们这化学实验室里可能没有-----
6楼2012-11-22 14:07:47
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gzj10_thu

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
高压破碎机
超声破碎仪

可以去找学生物的同学帮忙哈
7楼2012-11-22 17:34:13
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gsli87

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
超声细胞破碎仪,缓冲液什么的你查查文献就有
8楼2012-11-22 19:14:56
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

谢谢大家,感激不尽啊
9楼2012-11-22 19:53:25
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

加甘油的作用是什么啊?看到文献上有先用低渗溶液得到细胞质提取液,然后用低盐的溶液悬浮细胞核,再逐滴加入高盐的溶液而得到核提取物的。这样可以吗?为什么低盐再加高盐就能得到核提取物?什么原理啊?大侠们,帮帮忙啦----小女子在此先谢过了哦---
10楼2012-11-23 09:22:20
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