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分子菜鸟

木虫 (小有名气)

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可以买商品化的总蛋白提取液,还有核蛋白提取液。自己配也行。要是不能用SDS,别的表面活性剂能不能用?如果所有的表面活性剂都不行,就加甘油什么的。
11楼2012-11-24 09:16:27
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 分子菜鸟 at 2012-11-24 09:16:27
可以买商品化的总蛋白提取液,还有核蛋白提取液。自己配也行。要是不能用SDS,别的表面活性剂能不能用?如果所有的表面活性剂都不行,就加甘油什么的。

只是SDS不能用,Triton-100没有影响。我现在已经找到了超声破碎仪,想先试试这种方法看看对核里的蛋白结构有没有影响。你以前做过用过这种方法吗?具体操作和buffer可以告知吗?或者文献?
12楼2012-11-24 09:26:11
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分子菜鸟

木虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by xiaotianer at 2012-11-24 09:26:11
只是SDS不能用,Triton-100没有影响。我现在已经找到了超声破碎仪,想先试试这种方法看看对核里的蛋白结构有没有影响。你以前做过用过这种方法吗?具体操作和buffer可以告知吗?或者文献?...

没超过细菌、超过大肠杆菌,收集菌体后,加入pH7.4的PBS重悬,选择合适的功率就行了。要是能用Triton X-100的话,PBS里加一点加到细胞里就可以裂解了。
13楼2012-11-24 17:25:11
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