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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：在不破坏组蛋白结构的前提下，应该采用什么样的细胞裂解方法？
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：在不破坏组蛋白结构的前提下，应该采用什么样的细胞裂解方法？

如题：在不破坏组蛋白结构的前提下，应该采用什么样的细胞裂解方法？一定不能用SDS！！
求小木虫高人指点！！！
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1楼 2012-11-21 21:07:32
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分子菜鸟

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by xiaotianer at 2012-11-24 09:26:11
只是SDS不能用，Triton-100没有影响。我现在已经找到了超声破碎仪，想先试试这种方法看看对核里的蛋白结构有没有影响。你以前做过用过这种方法吗？具体操作和buffer可以告知吗？或者文献？...

没超过细菌、超过大肠杆菌，收集菌体后，加入pH7.4的PBS重悬，选择合适的功率就行了。要是能用Triton X-100的话，PBS里加一点加到细胞里就可以裂解了。
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13楼2012-11-24 17:25:11
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般是靠机械，比方说超声、玻璃珠什么的。具体条件要看你做的是什么物种。
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2楼2012-11-22 06:58:30
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-22 06:58:30
一般是靠机械，比方说超声、玻璃珠什么的。具体条件要看你做的是什么物种。

我用的是Hela细胞，想获得不破坏组蛋白结构的全细胞裂解液。您说的超声、玻璃珠能再具体点吗？一定要对核里的组蛋白没有影响哦---
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3楼2012-11-22 09:22:07
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xiaotianer

新虫 (初入文坛)
我是学化学的，对生物的不大懂，请大侠说的具体点吧
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4楼2012-11-22 09:28:11
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