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hellen1987木虫 (小有名气)
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2011年5月买的亚油酸，开封了，现在还能用吗？
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当时买的亚油酸没有充氮密封保存，就直接放在4摄氏度冰箱，一年多了，会不会被氧化了不能用了？大家谁比较有经验可以告诉我吗？ 我们买这个亚油酸是用作脂肪氧化酶活力测定的底物。 |
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hellen1987
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LOX酶活的测定 底物溶液配制：在N2保护下，取111μL亚油酸加入到10mL容量瓶中，用无水乙醇定容到10mL，得到浓度为1%（W/V）的亚油酸-无水乙醇溶液。取上述溶液3.55mL，加入40μL吐温-20。旋转蒸发除去乙醇，残余固形物溶解在50mL，0.05mol/L的Na2HPO4溶液中，往其中滴加1N NaOH，调节pH值至9.0。该底物溶液中亚油酸浓度和吐温-20的浓度分别为2.53×10-3mol/L、0.08%（w / v）。此溶液采用N2保护，5℃避光保存，备用。 粗酶液配制：将上述酶提取液用冷的0.1M醋酸（盐）缓冲液（pH4.5）稀释20倍，作为酶测定液，5℃冷藏，备用。 紫外分光光度法分析：检测温度25℃，检测波长234nm[。 反应液：2.0 mL缓冲溶液，200μL底物溶液，50μL粗酶液； 参比液：2.0 mL缓冲溶液，200μL底物溶液，50μL钝化处理的粗酶液。 反应在Beckman DU800分光光度计中进行，检测波长234nm，分光光度计调零时，参比池和样品池分别装入参比溶液，调零后，倒掉样品池中的参比液，加入2.0 mL缓冲溶液，200μL底物溶液，立刻加入50μL酶溶液，迅速混合，样品池放入原位，开始计时，该过程不超过10 s，光密度增量从最初的线性部分开始计算。 |
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13楼2014-07-31 18:10:57
sugz
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