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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 2011年5月买的亚油酸，开封了，现在还能用吗？
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药学白痴

新虫 (初入文坛)
要-4°保存的
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11楼2013-12-02 11:36:10
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lihaitao321

铁杆木虫 (著名写手)
送红花一朵
亲      请问你的脂氧合酶活性实验      对实验条件要求高吗   需不需要低温   避光    隔绝空气呢
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无论是趴下，还是奔跑，生活一直都在继续着...
12楼2014-07-30 15:41:42
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hellen1987

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by lihaitao321 at 2014-07-30 15:41:42
亲      请问你的脂氧合酶活性实验      对实验条件要求高吗   需不需要低温   避光    隔绝空气呢

LOX酶活的测定
底物溶液配制：在N2保护下，取111μL亚油酸加入到10mL容量瓶中，用无水乙醇定容到10mL，得到浓度为1%（W/V）的亚油酸-无水乙醇溶液。取上述溶液3.55mL，加入40μL吐温-20。旋转蒸发除去乙醇，残余固形物溶解在50mL，0.05mol/L的Na2HPO4溶液中，往其中滴加1N NaOH，调节pH值至9.0。该底物溶液中亚油酸浓度和吐温-20的浓度分别为2.53×10-3mol/L、0.08%（w / v）。此溶液采用N2保护，5℃避光保存，备用。
粗酶液配制：将上述酶提取液用冷的0.1M醋酸（盐）缓冲液（pH4.5）稀释20倍，作为酶测定液，5℃冷藏，备用。
紫外分光光度法分析：检测温度25℃，检测波长234nm[。
反应液：2.0 mL缓冲溶液，200μL底物溶液，50μL粗酶液；
参比液：2.0 mL缓冲溶液，200μL底物溶液，50μL钝化处理的粗酶液。
反应在Beckman DU800分光光度计中进行，检测波长234nm，分光光度计调零时，参比池和样品池分别装入参比溶液，调零后，倒掉样品池中的参比液，加入2.0 mL缓冲溶液，200μL底物溶液，立刻加入50μL酶溶液，迅速混合，样品池放入原位，开始计时，该过程不超过10 s，光密度增量从最初的线性部分开始计算。
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lihaitao321
13楼2014-07-31 18:10:57
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lihaitao321

铁杆木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by hellen1987 at 2014-07-31 18:10:57
LOX酶活的测定
底物溶液配制：在N2保护下，取111μL亚油酸加入到10mL容量瓶中，用无水乙醇定容到10mL，得到浓度为1%（W/V）的亚油酸-无水乙醇溶液。取上述溶液3.55mL，加入40μL吐温-20。旋转蒸发除去乙醇，残余固 ...

好的   谢谢了    最近一直做这个实验   没有做出结果   谢谢帮助
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无论是趴下，还是奔跑，生活一直都在继续着...
14楼2014-07-31 18:18:18
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wjr5578168

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by hellen1987 at 2014-07-31 18:10:57
LOX酶活的测定
底物溶液配制：在N2保护下，取111μL亚油酸加入到10mL容量瓶中，用无水乙醇定容到10mL，得到浓度为1%（W/V）的亚油酸-无水乙醇溶液。取上述溶液3.55mL，加入40μL吐温-20。旋转蒸发除去乙醇，残余固 ...

俺是菜鸟一只，也要测脂肪氧化酶活性，想问问您，取111μL或者200μL的液体用什么移取啊？移液枪吗？  3.55ml的液体又用什么仪器移取啊？望不吝赐教。
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15楼2015-11-12 15:28:51
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