24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gg880712

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 57
散金: 10
帖子: 41
在线: 9.7小时
虫号: 2054740
注册: 2012-10-11
性别: MM
专业: 植物病理学

[求助] 求助怎样使细菌细胞裂解但胞内的蛋白（例如酶）不失活？

如题：怎样使细菌细胞裂解但胞内的蛋白（例如酶）不失活？除了用超声波还有没有其他方法？

回复此楼

» 猜你喜欢

SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂已经有0人回复
氢氧化钾活化操作已经有19人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有116人回复
散金已经有68人回复
生物质超级电容器已经有0人回复
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析已经有0人回复
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点已经有0人回复
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点已经有0人回复
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快？已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼 2012-11-19 13:35:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

MolEPI: 2
应助: 81 (初中生)
金币: 1458.8
散金: 100
红花: 1
帖子: 430
在线: 196.7小时
虫号: 1512351
注册: 2011-11-27
专业: 生物化学

★ ★
小丹木木: 金币+2, 欢迎交流 2012-11-20 17:25:17

引用回帖:

5楼: Originally posted by gg880712 at 2012-11-19 18:08:30
我尝试过超声破碎，放在冰浴中，5秒破碎，5秒间隔，破碎了10分钟，但是离心后取上清做实验发现没有活性。我决定尝试一下溶菌酶。谢谢你呀...

超声波破碎后上清没有酶活可能是你超声波条件的问题
1：破碎细胞没破开，功率太低，时间太短都可能造成细胞没碎开，没碎开哪来酶活，你破碎后澄清一些没，相比破碎之前？
2：蛋白失活，不太清楚你是破的野生菌还是重组菌，可能的原因是功率太大超声波时间太长发热造成破碎后的蛋白变性了，这个你可以观察到超声波后有很多的片状沉淀，那就是变性的蛋白，重组菌的话还要考虑包涵体的问题.
PS：

GL.