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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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gg880712

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助怎样使细菌细胞裂解但胞内的蛋白(例如酶)不失活?

如题:怎样使细菌细胞裂解但胞内的蛋白(例如酶)不失活?除了用超声波还有没有其他方法?
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710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该可以用离心的方法吧,破坏细胞结构
may
3楼2012-11-19 15:01:24
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用无去垢剂缓冲液重悬,冰水浴超声破碎,离心取上清。
2楼2012-11-19 14:04:05
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linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gg880712: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-19 18:08:39
小丹木木: 金币+2, 欢迎应助 2012-11-20 17:25:03
这主要是涉及大破碎方法的问题:
常用的有  1. 超声波破碎,需要控制低温、工作/间隔时间、功率等;
              2. 溶菌酶+DNase,这个是温和的做法,应该适合楼主使用,protocol网上有很多;
              3. 高压破碎等。
小兵一个
4楼2012-11-19 15:34:48
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gg880712

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by linxt2005 at 2012-11-19 15:34:48
这主要是涉及大破碎方法的问题:
常用的有  1. 超声波破碎,需要控制低温、工作/间隔时间、功率等;
              2. 溶菌酶+DNase,这个是温和的做法,应该适合楼主使用,protocol网上有很多;
               ...

我尝试过超声破碎,放在冰浴中,5秒破碎,5秒间隔,破碎了10分钟,但是离心后取上清做实验发现没有活性。我决定尝试一下溶菌酶。谢谢你呀
5楼2012-11-19 18:08:30
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