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gg880712

新虫 (初入文坛)

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[求助] 求助怎样使细菌细胞裂解但胞内的蛋白（例如酶）不失活？

如题：怎样使细菌细胞裂解但胞内的蛋白（例如酶）不失活？除了用超声波还有没有其他方法？

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1楼 2012-11-19 13:35:14

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gg880712

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by linxt2005 at 2012-11-19 15:34:48
这主要是涉及大破碎方法的问题：
常用的有  1. 超声波破碎，需要控制低温、工作/间隔时间、功率等；
            2. 溶菌酶+DNase，这个是温和的做法，应该适合楼主使用，protocol网上有很多；
            ...

我尝试过超声破碎，放在冰浴中，5秒破碎，5秒间隔，破碎了10分钟，但是离心后取上清做实验发现没有活性。我决定尝试一下溶菌酶。谢谢你呀

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5楼2012-11-19 18:08:30

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

用无去垢剂缓冲液重悬，冰水浴超声破碎，离心取上清。

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2楼2012-11-19 14:04:05

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710002191

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

应该可以用离心的方法吧，破坏细胞结构

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may

3楼2012-11-19 15:01:24

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linxt2005

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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gg880712: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-19 18:08:39
小丹木木: 金币+2, 欢迎应助 2012-11-20 17:25:03

这主要是涉及大破碎方法的问题：
常用的有  1. 超声波破碎，需要控制低温、工作/间隔时间、功率等；
            2. 溶菌酶+DNase，这个是温和的做法，应该适合楼主使用，protocol网上有很多；
            3. 高压破碎等。

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小兵一个

4楼2012-11-19 15:34:48

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