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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于酵母转化，急急急，跪求大神们帮忙~
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大脚-love-me

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于酵母转化，急急急，跪求大神们帮忙~

大家好，小女现在正在做酿酒酵母转化，做了快一个月了，还没转出来，老板催，我快急死了。求大家帮帮忙
我做的是敲除组件的转化，也就是线性化的质粒转化，书上说线性化的质粒不好转化，效率低，我用的电转，转了好几次了，没转出来，
求助大家，如果就用环状的质粒转化，会不会同源重组的效率很低呀，还有就是线性化质粒转化大家一般用哪种方法，谢谢大家了，祝大家都能实验顺利~
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1楼 2012-11-19 10:41:51
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我之前做过酵母转化，是环状质粒转的，具体转化方法就是按照clone tech的说明书转的AcLi法，转的还好啊
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2012-11-19 11:51:12
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txq0937

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们做的实验，都是质粒线性化过后转的，效果不错
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能人
3楼2012-11-19 14:31:53
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linxt2005

金虫 (小有名气)
请教一下各位虫友，酿酒酵母与毕赤酵母转化及表达测试的方法类似吗？
目前只做过毕赤酵母的，还没有尝试过酿酒酵母，了解一下。
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小兵一个
4楼2012-11-19 14:45:23
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花素馨

新虫 (初入文坛)
亲，昨天用的我师妹的号发的帖子，这是我，
环状的质粒是比较好转，但是同源重组效率不行呀，
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5楼2012-11-20 10:14:35
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花素馨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-11-19 11:51:12
我之前做过酵母转化，是环状质粒转的，具体转化方法就是按照clone tech的说明书转的AcLi法，转的还好啊

亲，你的实验操作能给我一份么，还有就是对质粒的要求是什么，
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6楼2012-11-20 10:15:38
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花素馨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by txq0937 at 2012-11-19 14:31:53
我们做的实验，都是质粒线性化过后转的，效果不错

亲，你的实验操作能给我一份么，还有就是对质粒的要求是什么，
线性化以后，转化的效率好像明显不如环状的时候啊，唉
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7楼2012-11-20 10:17:15
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花素馨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by linxt2005 at 2012-11-19 14:45:23
请教一下各位虫友，酿酒酵母与毕赤酵母转化及表达测试的方法类似吗？
目前只做过毕赤酵母的，还没有尝试过酿酒酵母，了解一下。

好像不太一样的，针对毕赤酵母很著名很成熟的一款质粒，ppic9K，但是酿酒酵母就没有这样类似的同源重组表达载体，唉
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8楼2012-11-20 10:18:36
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chs4502

金虫 (小有名气)
期待大神的出现啊。。。
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9楼2012-11-20 10:42:30
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