做基因克隆，目的片段1100bp，PCR体系25μl：DNTP 4μL,buffer 2.5μL,引物各 1μL，模版DNA 1μL(用试剂盒提的，浓度在50-80ng/μL），TAKARA LA taq 0.25 μL,ddH2O 15.25 μL。PCR反应程序为;94℃ 5min,94℃ 30s，65℃ 30s, 72℃ 1min,72℃ 7min,40个循环。1.2%的琼脂糖，100V，50min。2000的marker。切胶回收把所有的都加上了。之前扩得很顺利，这一阵不知道怎么回事，就是出不来了，有的话条带也很浅，拖尾十分严重。。以为是模版的问题，又重新提了DNA，把酶、引物还有缓冲液都换过一遍了，结果还是一样，，现在实验停滞不前了，望各位高手帮我分析分析找找解决办法。。。。。
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1.png上面为DNA的编号，每个样本P了两管。
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2.png
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4.png之前跑的正常的图片 |
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