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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌感受态加甘油至50%会不会对转化效率有影响？
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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌感受态加甘油至50%会不会对转化效率有影响？

我最近用T载体做连接和转化，细菌老是不长，会不会和甘油过多有关系？
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1楼 2012-11-01 09:32:03
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szylnl

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
甘油就是1:1加的啊，是其它问题吧
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

linsui1989
用百分之百的努力去做每件事
2楼2012-11-01 09:33:35
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linsui1989

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by szylnl at 2012-11-01 09:33:35
甘油就是1:1加的啊，是其它问题吧

好的，谢谢了
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3楼2012-11-01 09:43:36
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竹子小小

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是细菌问题你可以转个连好的载体试试看
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4楼2012-11-01 10:16:02
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你做几个对照看一下就基本排除了！
赞一下 回复此楼
持之以恒、永不放弃！
5楼2012-11-01 10:40:55
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
转化问题吧，uo可能是连接没有做好
赞一下 回复此楼
让复杂的事情变简单，简单的事情更简单
6楼2012-11-01 11:19:19
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kakayh

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
很可能是连接的问题，建议多摇一下，稍稍离心，去掉部分上清，其余的菌液混匀全部涂板，只要连接上去，就一定会长，如果没长就真的是连接的问题了。
连接的话，连接片段DNA浓度很重要不要太稀
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7楼2012-11-01 11:29:05
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titus0805

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
linsui1989: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-11-02 19:23:47
甘油多了，是50%的甘油1:1加入，终浓度在15-25%之间比较好
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8楼2012-11-01 12:48:29
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人建议，仅供参考！
你这甘油浓度也太高了，25-30%就好了。
你买的T载体里面一定会有阳性control的，同一条件一起做一次试试不就知道了。
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9楼2012-11-01 13:44:21
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
甘油加多了，重新做感受态吧
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10楼2012-11-01 14:14:31
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