24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1719  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xuyan_1215

新虫 (小有名气)

[求助] 超低分子量SDS-PAGE

各位虫友:
    我最近在做小肽蛋白的表达,由于目的蛋白分子量特别小(7.8KD)用常规的SDS-PAGE方法跑不出来,请教一下是否有人做过超低分子量蛋白电泳,以及具体的实验步骤,谢谢。。。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

1232

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuyan_1215

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gelois at 2012-11-01 09:27:01
给你一个文档,里面是三层胶的具体配方,还有阴极阳极液体的配方。

跑三层胶的时候,最好把电压降低一点,在冰上跑,这样跑出来的胶质量会比较好,不会糊掉。


Tricine-SDS-PAGE具体步骤.doc(32KB)
http:// ...

请问你说的在冰上跑的意思就是要把电泳槽放到冰上吗?还有,我的目的蛋白是7.8KD的,分离胶是用16%的还是用20%的比较合适?
3楼2012-11-01 11:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xuyan_1215: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-11-01 11:09:37
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-11-02 13:36:01
给你一个文档,里面是三层胶的具体配方,还有阴极阳极液体的配方。

跑三层胶的时候,最好把电压降低一点,在冰上跑,这样跑出来的胶质量会比较好,不会糊掉。


Tricine-SDS-PAGE具体步骤.doc(32KB)
http://kuai.xunlei.com/d/GFUNGFPLMHGH?p=130497
2楼2012-11-01 09:27:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gelois

金虫 (正式写手)

amisking: 回帖置顶 2012-11-01 19:56:57
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuyan_1215 at 2012-11-01 11:10:51
请问你说的在冰上跑的意思就是要把电泳槽放到冰上吗?还有,我的目的蛋白是7.8KD的,分离胶是用16%的还是用20%的比较合适?...

恩,是的,把电泳槽埋在冰里。
7.8的话,16%应该就可以跑出来了,20%的估计会跑的更加慢,而且效果还不一定会好。用16%的吧。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-11-01 11:16:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

7.8kD算是超低分子量?分这个范围的蛋白不用Tricine胶也可以的,可以在普通SDS-PAGE中加尿素。也可以做一个梯度胶。
5楼2012-11-01 14:55:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] +6 化工专硕323分 2026-04-04 6/300 2026-04-10 10:04 by may_新宇
[考研] 080100力学316求调剂 +7 L_Hairui 2026-04-07 7/350 2026-04-10 09:45 by vgtyfty
[考研] 268分085602化学工程调剂 +24 月照花林。 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 08:09 by Sammy2
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +5 白云123456789 2026-04-09 7/350 2026-04-09 21:03 by 白云123456789
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
[考研] 求调剂希望还是希望在山河四省附近 +3 快乐的小白鸽 2026-04-05 3/150 2026-04-09 17:36 by wp06
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +3 安小满zzz 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:16 by wp06
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-09 8/400 2026-04-09 15:17 by 探123
[考研] 349学科化学045106求调剂,化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
[论文投稿] Decision: Revise for Editor还会送审吗 100+3 CccccccccFD 2026-04-04 5/250 2026-04-07 10:58 by 北京莱茵润色
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分,求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
[考研] 材料调剂 +14 壹贰贰亿 2026-04-04 14/700 2026-04-05 23:31 by 来看流星雨10
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +13 洛神哥哥 2026-04-03 13/650 2026-04-05 17:27 by zzx2138
[考研] 085600调剂 +9 东照照照 2026-04-04 9/450 2026-04-05 13:44 by ujn_zhuj
[考研] 358求调剂 +7 秋gk 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:29 by huangmoli
[考研] 材料调剂 +9 革微桂 2026-04-04 9/450 2026-04-05 08:27 by 544594351
[考研] 368求调剂 +5 今华习 2026-04-03 7/350 2026-04-04 18:47 by imissbao
[考研] 一志愿南农090401,268,求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
[考研] 22408,264求调剂 +3 ywh729 2026-04-03 4/200 2026-04-04 11:04 by ywh729
[考研] 268求调剂 +8 你好tg 2026-04-03 9/450 2026-04-04 05:08 by gswylq
信息提示
请填处理意见