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pET-40b蛋白表达
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| 近期我用pET-40b载体表达蛋白,现在蛋白表达后过Ni柱发现有点问题:pET-40b Dsbc后带有His标签,多克隆位点末尾也带有His标签,我构建克隆是两个His标签都保留了,用凝血酶切后Dsbc和目的蛋白都带有His标签,过Ni柱不好分开,当初就是为了和Ni柱结合牢固才保留两个His标签,现在不想重新构建克隆,不知哪位高人有什么好的办法。目的蛋白15KD,Dsbc大约34KD。 |
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