应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 怎样扩增新的基因完整片段
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
331/1返回列表
查看: 2151  |  回复: 32
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wangds

金虫 (正式写手)

[交流] 怎样扩增新的基因完整片段

最近利用简并引物扩增出一段功能基因，与参考基因的同源性约87%，请问要扩增两端的序列怎么做，是用gene walking还是反向PCR？求高手指教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-10-26 09:05:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangds

金虫 (正式写手)
基因是从是细菌获得的
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-26 09:08:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aloon111

金虫 (正式写手)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
可以做race
回复此楼
3楼2012-10-26 10:31:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

srtong

新虫 (小有名气)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
gene walking需要知道sequence。
赞一下 回复此楼
18楼2012-10-26 14:05:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangds

金虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by srtong at 2012-10-26 14:05:21
gene walking需要知道sequence。

我已经扩增了一部分，在NCBI上比对了，87%相似，下面该怎么做啊？求教！
赞一下 回复此楼
21楼2012-10-26 14:49:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shine栗宁

新虫 (初入文坛)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
难……
回复此楼
22楼2012-10-26 14:51:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
25楼2012-10-26 21:39:18
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
如果是细菌，用genome walking容易些，没有必要用RACE，太麻烦。
赞一下 回复此楼
26楼2012-10-27 01:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
根据你扩的序列设计特异引物，和genomewalking试剂盒的引物配对扩已知序列两端的未知序列。
赞一下 回复此楼
27楼2012-10-27 01:43:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
过来学习一下，呵呵
赞一下 回复此楼
29楼2012-10-27 19:56:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王文钊-

木虫 (小有名气)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
做RACE试试，根据你已知的那段序列分别设3'5'引物，扩完了再拼接
赞一下 回复此楼
30楼2012-10-28 12:44:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
gene walking 和反向PCR都可以
赞一下 回复此楼
31楼2012-10-28 12:55:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

游侠892

铁杆木虫 (著名写手)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
race应该是比较好的方法吧
赞一下 回复此楼
32楼2012-10-28 19:23:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinn

新虫 (初入文坛)
★
wangds(金币+1): 谢谢参与
情况跟你差不多，我做的反向PCR，做出了已知序列的后一半，还差前一半
赞一下 回复此楼
33楼2014-05-16 17:10:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
blackdogzmz4楼
2012-10-26 10:48   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
hofo3366995楼
2012-10-26 11:39   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
lhk-236楼
2012-10-26 11:41   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
偶尔呆7楼
2012-10-26 11:53   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
hj8905098楼
2012-10-26 11:55   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
shannon20109楼
2012-10-26 12:10   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
sxmai8910楼
2012-10-26 12:19   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
JIA-qiqi11楼
2012-10-26 12:21   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
cl1985312楼
2012-10-26 12:22   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
cl6613楼
2012-10-26 12:30   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
favor_99914楼
2012-10-26 12:36   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
qiuyunhen15楼
2012-10-26 12:53   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
yindx81916楼
2012-10-26 13:11   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
hxp280017楼
2012-10-26 13:46   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
hzj1239919楼
2012-10-26 14:14   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
品诗十四行20楼
2012-10-26 14:19   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
chenghu23楼
2012-10-26 15:27   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
顶
woai82024楼
2012-10-26 15:35   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
cai311027428楼
2012-10-27 12:04   回复  
wangds(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangds 的主题更新
331/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学，化工，生物，生医工等专业优秀学子加入！ +3 llss0711 2026-03-28 5/250 2026-03-29 00:23 by MRMFYTL
[考研] 11408软件工程求调剂 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:50 by zhq0425
[考研] 071000生物学求调剂，初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 085404求调剂，总分309，本科经历较为丰富 +4 来财aa 2026-03-25 4/200 2026-03-28 07:41 by 棒棒球手
[考研] 340求调剂 +5 jhx777 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:18 by fmesaito
[考研] 一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂 +7 18419759900 2026-03-25 8/400 2026-03-27 16:38 by 18419759900
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +10 幸运的酱酱 2026-03-22 12/600 2026-03-27 16:08 by muchong357
[考研] 283求调剂（080500） +4 A child 2026-03-27 4/200 2026-03-27 15:34 by XPU李庆
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 081700 调剂 267分 +11 迷人的哈哈 2026-03-23 11/550 2026-03-26 15:41 by zzll406
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 材料专硕331求调剂 +4 鲜当牛 2026-03-24 4/200 2026-03-24 15:58 by JourneyLucky
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭