24小时热门版块排行榜    

查看: 4173  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhuzhuba1

银虫 (初入文坛)

[求助] PCR提总RNA时,最后溶于DEPC水时有沉淀,不能完全溶解,是什么原因,能怎么补救

大鼠足爪样本,同样取两个样本,同样条件,最后,一个样本在溶于DEPC水时有白色沉淀,稍一放置就分层,上层很透明,下层白色沉淀,之前在加异丙醇时沉淀就稍大,最后260/280的比值只有1.4,浓度300多,现在的关键问题是我没时间再做一批动物实验,有没有什么补救措施,再出现这种情况
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Everpower

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
看天: 金币+3, 鼓励交流 2012-10-23 17:31:02
我经常提动物组织RNA,如果遇到加DEPC水而有白色沉淀不溶,有可能是RNA量太多了,而导致的不溶,也有可能没有涡旋震荡,充分涡旋后就能溶解了!
5楼2012-10-23 10:44:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

yanzimeng1

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-10-20 08:03:51
看天: 金币+2, 鼓励交流 常来 2012-10-23 17:30:31
没做过动物的,但是我做过植物的,不过道理应当是一样的。你可以把这批样品重新纯化一下,也就是重新用氯仿等按步骤重新抽提。你这样的应该是RNA中有不溶性的物质。另外在重新抽提的时候可以加大体系,也就是你的RNA如果溶解在100微升的水中,那么可以再加些DEPC水进去,把体系变大。这样在加入抽提剂纯化的时候,RNA损失量要小些。我提取植物RNA的时候碰到过这种情况,不知道对你的实验是否合适,可以试试。希望能帮到你。
2楼2012-10-19 19:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxl007777

铁杆木虫 (正式写手)

PCR提?好吧,没用过这方法……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-10-20 09:14:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuzhuba1

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yanzimeng1 at 2012-10-19 19:37:32
没做过动物的,但是我做过植物的,不过道理应当是一样的。你可以把这批样品重新纯化一下,也就是重新用氯仿等按步骤重新抽提。你这样的应该是RNA中有不溶性的物质。另外在重新抽提的时候可以加大体系,也就是你的RN ...

这个沉淀到底哪一步产生的,重新提,加多少氯仿呢,原来是加1mltrizol加0.2ml氯仿的,还是加0.2ml氯仿吗
4楼2012-10-22 20:03:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 281求调剂(0805) +12 烟汐忆海 2026-03-16 23/1150 2026-03-20 12:50 by 功夫疯狂
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-18 8/400 2026-03-20 12:12 by 学员8dgXkO
[考研] 317求调剂 +4 申子申申 2026-03-19 8/400 2026-03-20 11:20 by 申子申申
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +3 lemonzzn 2026-03-17 4/200 2026-03-20 11:04 by lemonzzn
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-03-18 5/250 2026-03-20 09:00 by ZHANG0tao
[考研] 265求调剂 +6 梁梁校校 2026-03-17 6/300 2026-03-20 08:59 by ZHANG0tao
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +17 enenenhui 2026-03-13 18/900 2026-03-20 08:55 by xingguangj
[考研] 288求调剂 +15 于海海海海 2026-03-19 15/750 2026-03-19 22:41 by 学员8dgXkO
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 化学求调剂 +3 临泽境llllll 2026-03-17 4/200 2026-03-19 13:59 by houyaoxu
[考研] 一志愿天大材料与化工(085600)总分338 +5 蔡大美女 2026-03-13 5/250 2026-03-19 10:44 by 是小刘呀~
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-17 7/350 2026-03-18 20:41 by Wangjingyue
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
信息提示
请填处理意见