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PCR提总RNA时，最后溶于DEPC水时有沉淀，不能完全溶解，是什么原因，能怎么补救
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| 大鼠足爪样本，同样取两个样本，同样条件，最后，一个样本在溶于DEPC水时有白色沉淀，稍一放置就分层，上层很透明，下层白色沉淀，之前在加异丙醇时沉淀就稍大，最后260/280的比值只有1.4，浓度300多，现在的关键问题是我没时间再做一批动物实验，有没有什么补救措施，再出现这种情况 |
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4楼2012-10-22 20:03:50
yanzimeng1
金虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-10-20 08:03:51
看天: 金币+2, 鼓励交流 常来 2012-10-23 17:30:31
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| 没做过动物的，但是我做过植物的，不过道理应当是一样的。你可以把这批样品重新纯化一下，也就是重新用氯仿等按步骤重新抽提。你这样的应该是RNA中有不溶性的物质。另外在重新抽提的时候可以加大体系，也就是你的RNA如果溶解在100微升的水中，那么可以再加些DEPC水进去，把体系变大。这样在加入抽提剂纯化的时候，RNA损失量要小些。我提取植物RNA的时候碰到过这种情况，不知道对你的实验是否合适，可以试试。希望能帮到你。 |
2楼2012-10-19 19:37:32
3楼2012-10-20 09:14:34
5楼2012-10-23 10:44:07
