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植物CAT测定问题
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| 我昨天测CAT时，数据变动的很慢，我记得以前测了一次变动的很快啊，最后两位数不停的在变动，然后5s读一次数，但以前测的可能不大对，我从找了确定的方法开始测，昨天按新方法测不知道怎么搞的和以前不一样，我是取了200mlPBS加0.3092ml过氧化氢当反应液，酶液是取了0.1毫升，反应很明显，比色皿里面气泡很多，但是测的时候数据就是变动很慢，我是1min读一次数，结果有时1min后数据没变动，得再等个十几秒再动，下一分钟却准时的变了，而且我平行之间数据重现性很高，有时候几个平行之间好几个数都一样但又有个数不一样这不就差大了？我这仪器没问题。请问大家测植物CAT时也是这样吗？你们数据变化的快嘛？我这个正常吗？ |
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starseacow
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你第一个帖子中的问题，我以前做在一些样品中偶尔见过这种现象，加了酶液开始反应但没有变化，这很可能和酶液保存过程中发生某些未知变化有关，总之是有的样品做不出来了。我的方案是每个处理多做几个重复。但如你所说成批次的没有结果，在排除仪器和测定方法的问题后，看看你的酶提取是不是有问题，有些试剂是否需要重新配置。另外，在做CAT或其他酶活前，最好做个预实验，测测你的测定条件下，对照组样品酶活变动情况。一般酶活变化随时间呈S型曲线，尽量选择其中斜线快速变化段测定。 第二个问题，我没印象762是什么样子的了，如果是有四个比色皿槽那种，就准备四个比色皿，一个作为空白调零，样品准备三份放在不同比色皿内，测一个后改变波长调零，再测下一个。我以前用UV2401PC，可以直接扫全波长，每个样品我就直接扫了，再读数计算。 |
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2楼2012-10-18 09:22:16
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