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Lynn和Mia金虫 (小有名气)
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[求助]
Western Blot测蛋白浓度的仪器
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最近做WB，但是酶标仪562的滤波片迟迟不来，所以想问问各位做WB的站友们，你们实验室测蛋白浓度的时候用的是什么仪器呢？另外我查到一位华中科技大学的博士论文用的考马斯亮蓝，1ml的体系，测OD260，但是他没写用什么仪器，有战友知道这是什么仪器或者方法不？或者有木有华中科技大学生物化学与分子生物学专业的站友知道你们实验室的这种仪器呢？欢迎大家多多交流~~~感谢感谢 |
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Lynn和Mia
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
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- 虫号: 1634741
- 注册: 2012-02-22
- 专业: 蛋白质组学
3楼2012-10-15 18:13:37
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
Lynn和Mia: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-10-15 18:09:46
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-10-16 13:37:14
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测蛋白浓度的方法有多种：紫外分光光度法，凯氏定氮法、双缩脲法、Lowry 法，BCA法，胶体金法，考马氏亮蓝染色法、银染法 ，我们实验室常用的是BCA法，从碧云天直接买kit就行，但是也是要检测562nm的吸收光，如果你们的酶标仪没有这个滤波片就比较麻烦了，现在有很多全波长的酶标仪，不知道你们实验室有没有，像thermo 的veriscan，MD的M5，还有Flex station都可以。 还有用考马斯亮蓝，好像检测的是595nm，不是OD260 紫外分光光度法是检测260nm，但是核酸会影响蛋白浓度的测定。 |
2楼2012-10-15 16:36:45
