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[求助]
请大家帮我看看我的southern blot 图片，不知道问题出在哪里了，谢谢 已有1人参与
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southern blot 实验目的是为了验证突变体基因被敲除（1,2分别是两个不同突变体） 1.使用单酶切5小时左右； 2.基因组DNA浓度约为450ng/uL，上样量每孔50微升，跑胶（0.8%）5小时左右，条带很亮； 3.试剂盒是Roche Kit I, 洗脱条件为：68℃ 2×SSC，0.1%SDS 洗30min, 68℃ 0.5×SSC，0.1%SDS 洗15min，洗两次； 4.探针是PCR目的基因部分片段的回收产物，大小约为400和700bp。 问题： 探针第一和第二次用的相同，第一次Marker（TAKARA DL15000）未杂出条带，目的基因野生型与突变体有目的条带； 第二次-1基因做出来了，-2效果不太好； 第三次-1是新做的探针，有杂带，背景信号也很高，-2仍是之前的探针，却没有杂出目标条带。 麻烦大家帮我分析分析是什么原因，有什么好的解决方法。不甚感激~~~~  第一次-1.jpg  第一次-2.jpg  第二次-1.jpg  第二次-2.jpg  第三次-1.jpg  第三次-2.jpg |
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