24小时热门版块排行榜    

查看: 4553  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wei_suzhen

新虫 (小有名气)

[求助] 怎样确定合适的Tm值?

下面是我的引物的一些数据,根据这些数据怎么设计合适的退火温度?如果利用温度梯度来寻找合适的退火温度,大约从哪个范围设计温度,梯度是多少?每个梯度需要设计几个重复样品?

引物设计.png
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验操作

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by wei_suzhen at 2012-10-14 19:36:17
你好,如果做温度梯度,一般相邻每个温度相差多少...

PCR仪上有梯度功能,一般是A-H自上而下8排的温度从高到低。你只需选好温度范围,例如55-65度什么的,仪器会自动设置一个线性梯度平均分配在这8排样品中。
8楼2012-10-15 01:11:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

古屋子

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做梯度最好每隔温度梯度做两个重复,另外还得做空白对照
3楼2012-10-14 16:34:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wei_suzhen

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ilyzp at 2012-10-14 17:09:02
其实软件上已经给出了Tm值了,但是如果要做PCR还要看你在哪个公司合成引物,像是三博和华大,一般的Tm值都会比软件设计的还要高,你就用Tm-5去做就行,如果是英俊合成,一般Tm都比较低,会比软件设计的低很多,但是 ...

是生工生物工程(上海)公司合成的。不过引物还没送回来,现在设计一些实验方案。确定一下最适的退火温度
5楼2012-10-14 19:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wei_suzhen

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 古屋子 at 2012-10-14 16:34:48
做梯度最好每隔温度梯度做两个重复,另外还得做空白对照

你好,想问下怎么做空白对照
6楼2012-10-14 19:34:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了,离AI做有机合成还有多远? +3 wangyl_123 2026-10-10 6/300 2026-10-11 15:04 by Abin0406
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷!
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么? +3 好运来~9527 2026-10-10 5/250 2026-10-11 09:00 by 好运来~9527
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬,路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费,对账才发现官费比别人多掏了一倍 +5 13108017953 2026-10-08 5/250 2026-10-10 11:15 by wdwd123
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些? +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
请填处理意见