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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 感受态转化
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380218013

金虫 (小有名气)

[交流] 感受态转化

最近小弟做感受态转化实验。结果发现空的感受态在AMP平板也长菌落。AMP平板式100毫升+100微升AMP（100毫克每毫升），这样终浓度是100微克每毫升。有木有人有同样的经历和解决办法啊 ？？？
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1楼 2012-10-13 09:09:16
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by 380218013 at 2012-10-13 20:01:28
就是说空载的感受态本身是可以再AMP上长的是吗？？我是涂布之后过夜的  肯定过18h了...

你的空对照是加了空载体，还是直接用感受态细胞做的呀？什么都不加或者加水做的空对照不能在氨苄板上长。如果是查看载体自连的情况用没加插入片段的空载体做的对照是可以在抗性板上长的。至于时间过长而导致氨苄失效的问题要看你空板上的菌落大小，是否和转化了连接产物的一样呢？
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19楼2012-10-14 01:17:19
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seraph09

新虫 (初入文坛)
★
380218013(金币+1): 谢谢参与
你得感受态是买的还是自己做的？能不能详细说明你得转化步骤？
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2楼2012-10-13 09:17:17
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j2

木虫 (正式写手)
★
380218013(金币+1): 谢谢参与
AMP是否有效？感受态是自制还是购买？
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3楼2012-10-13 09:30:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
380218013(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-13 16:28:05
如果是购买的感受态细胞，应该不能在氨苄板上长，有可能是抗生素部分失效，或者是到平板是培养基太热。氨苄对温度比较敏感，到板时要让培养基温度冷却到50度以下再加抗生素。
如果自制的感受态，有可能是做感受态过程中有污染。
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4楼2012-10-13 09:45:36
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