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琉月2012

铁虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白提取率低怎么办?

用碱溶酸沉 超声辅助提取的方法提取亚麻蛋白,可是提取率却很低,怎么办??是亚麻胶的原因吗?可是怎样去除饼粕里的亚麻胶呢???请教高人指点啊!!!
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syuchenj

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
琉月2012: 金币+1, ★★★很有帮助, 太感谢了,我会都试试看的! 2012-10-14 10:04:37
hsd3521: 回帖置顶 2012-10-17 11:37:11
你需要每一步测定蛋白质的提取率,以判断问题出在哪里
(1)测定原始体系中蛋白质含量,
(2)提取后,测定提取液中的蛋白质含量(注意方法不能改变,如果是凯氏定氮,那么全部用凯氏定氮),计算得率
(3)酸沉后,再测定沉淀物中含量

以上三步后,基本而已判断,你是没有提取出来还是沉淀操作丢失。
如果沉淀操作丢失,那么查资料并做个梯度核实,就可以提高得率。

如果是提取操作不合适,那就改进提取操作
(1)碱溶条件,如果你的原料是粕之类的,本身变性严重,那么需要利用比较强的条件!
(2)超声波未必合适,需要步步测定,尤其是对于已变性体系
(3)加糖酶,解开限制——这个需要试试,看看结合状态是什么多糖限制了,选择合适的糖酶很重要,纤维素酶,半纤维素酶,果胶酶?还是其他聚糖酶,效果不同!

祝你好运!

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3楼2012-10-14 09:22:24
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普通回帖

040750127

木虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以考虑看看碱液和酸液的选取以及浓度问题

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2012-10-13 22:12:18
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琉月2012

铁虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 040750127 at 2012-10-13 22:12:18
可以考虑看看碱液和酸液的选取以及浓度问题

一般好像都是用NaoH,HCl,的,浓度是1mol/l  的。这也很有影响的吗?
4楼2012-10-14 10:07:32
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琉月2012

铁虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by syuchenj at 2012-10-14 09:22:24
你需要每一步测定蛋白质的提取率,以判断问题出在哪里
(1)测定原始体系中蛋白质含量,
(2)提取后,测定提取液中的蛋白质含量(注意方法不能改变,如果是凯氏定氮,那么全部用凯氏定氮),计算得率
(3)酸沉 ...

还有就是碱提后,我也酸沉过,可是沉淀得依然是很少的,所以我觉得好像应该是没有提取出来的,很可恼啊,就是感觉提取不出来的样子
5楼2012-10-14 10:10:56
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sunshuaiwen

新虫 (初入文坛)

放冰箱一晚上试试,我弄过别的蛋白,放一晚上蛋白就沉降了
6楼2012-10-16 19:35:29
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sunnymen

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by syuchenj at 2012-10-14 09:22:24
你需要每一步测定蛋白质的提取率,以判断问题出在哪里
(1)测定原始体系中蛋白质含量,
(2)提取后,测定提取液中的蛋白质含量(注意方法不能改变,如果是凯氏定氮,那么全部用凯氏定氮),计算得率
(3)酸沉 ...

请问测定提取液中蛋白含量除了凯氏定氮还有其他方法没有,thank you !
7楼2012-10-19 16:58:50
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她小她

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by sunnymen at 2012-10-19 16:58:50
请问测定提取液中蛋白含量除了凯氏定氮还有其他方法没有,thank you !...

测定提取液浓度,选用凯氏定氮法很麻烦呀,为什么不选用考马斯亮蓝。
8楼2013-10-30 20:47:20
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dzlg20000

金虫 (初入文坛)

亚麻蛋白具体是个什么东西啊?有什么作用
半月沉江
9楼2013-10-31 12:57:04
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sunnymen

银虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 她小她 at 2013-10-30 20:47:20
测定提取液浓度,选用凯氏定氮法很麻烦呀,为什么不选用考马斯亮蓝。...

各种测蛋白的方法根据你的目标选择,考马斯亮蓝确实简单,但是它的测定值相对真实值偏低,而且重现性不好
10楼2013-10-31 15:46:16
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