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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物检测有的点样孔很亮，但没有条带。请各位高手指导。
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轻清1106

铜虫 (小有名气)

[交流] PCR产物检测有的点样孔很亮，但没有条带。请各位高手指导。 已有11人参与

第一排前12个是DNA检测，其余是PCR产物检测。图中点样孔很亮的，没有条带是为什么呢。是没有P出来吗？请各位指导指导。

2012.10.05.jpg
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1楼 2012-10-07 11:54:17
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古屋子

铁虫 (初入文坛)
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感觉前12 个是PCR产物，后面才是DNA 样
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4楼2012-10-07 14:57:16
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junminh

铜虫 (小有名气)
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没有P出来，重新P吧，结果太差了。
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7楼2012-10-08 09:25:57
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bohr86

木虫 (正式写手)
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你跑胶的电压是多少？
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2楼2012-10-07 13:36:14
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by bohr86 at 2012-10-07 13:36:14
你跑胶的电压是多少？

180v，跑25min
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3楼2012-10-07 14:32:19
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bohr86

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 轻清1106 at 2012-10-07 14:32:19
180v，跑25min

电压是不是有点高了，导致PCR产物相互阻塞，没跑出泳道。电泳槽多大啊？ 你的电压是多少V/cm?
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5楼2012-10-07 15:07:36
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same123456

银虫 (正式写手)
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应该是没P出来，要是RAPD就很正常，重做一遍就是了
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6楼2012-10-07 18:58:25
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xunmeng828

铁虫 (初入文坛)
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估计是你加的模板量高了，可以降低模板的量或适当提高引物的量。
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8楼2012-10-08 10:13:01
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jk_xlzy

银虫 (小有名气)
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支持上楼的，PCR反应体系比例没弄好，导致了扩增失败，或者酶加得过多导致非特异性扩增。有个现象：你看第一排后边十二个的亮带，几乎就在点样孔哦，具体原因还得请楼下的点评～
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9楼2012-10-08 11:07:49
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勇者无畏

木虫 (正式写手)

金虫
★
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首先肯定目的产物没p出来。应该是加的酶过多，把电压调低，100V50min,楼主再做一次吧，
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10楼2012-10-08 11:25:23
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