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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物检测有的点样孔很亮，但没有条带。请各位高手指导。
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by bohr86 at 2012-10-07 15:07:36
电压是不是有点高了，导致PCR产物相互阻塞，没跑出泳道。电泳槽多大啊？ 你的电压是多少V/cm?...

30cm的电泳槽，6V/cm，应该不会高吧。
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11楼2012-10-12 16:36:02
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by same123456 at 2012-10-07 18:58:25
应该是没P出来，要是RAPD就很正常，重做一遍就是了

重复了，总是会有一两个会这样子。
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12楼2012-10-12 16:36:35
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by xunmeng828 at 2012-10-08 10:13:01
估计是你加的模板量高了，可以降低模板的量或适当提高引物的量。

好的。谢谢！
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13楼2012-10-12 16:37:36
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by jk_xlzy at 2012-10-08 11:07:49
支持上楼的，PCR反应体系比例没弄好，导致了扩增失败，或者酶加得过多导致非特异性扩增。有个现象：你看第一排后边十二个的亮带，几乎就在点样孔哦，具体原因还得请楼下的点评～

嗯嗯。谢谢，只好重新优化一次了。
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14楼2012-10-12 16:38:48
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
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10楼: Originally posted by 勇者无畏 at 2012-10-08 11:25:23
首先肯定目的产物没p出来。应该是加的酶过多，把电压调低，100V50min,楼主再做一次吧，

后来我试了120V，40min，效果没多大变化呀。。
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15楼2012-10-12 16:39:52
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by junminh at 2012-10-08 09:25:57
没有P出来，重新P吧，结果太差了。

没辙。。这算是好的了，平常几天又结果，然后几天没结果。悲剧。。
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16楼2012-10-12 16:40:27
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 古屋子 at 2012-10-07 14:57:16
感觉前12 个是PCR产物，后面才是DNA 样

啊。。不会吧
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17楼2012-10-12 16:42:41
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勇者无畏

木虫 (正式写手)

金虫
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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15楼: Originally posted by 轻清1106 at 2012-10-12 16:39:52
后来我试了120V，40min，效果没多大变化呀。。...

兄弟的目的产物没出来，再摸索一下反应体系和条件吧
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18楼2012-10-12 16:52:31
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轻清1106

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 勇者无畏 at 2012-10-12 16:52:31
兄弟的目的产物没出来，再摸索一下反应体系和条件吧...

一样的条件之前做出来了呀。。难道是加样的问题？
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19楼2012-10-13 17:09:00
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王文钊-

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
全是二聚体么。。。。。。引物没设计好？
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20楼2012-10-19 21:53:50
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