24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1187  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sutol329

新虫 (初入文坛)

[求助] ELISA的一些小疑问

最近刚开始准备设计做一个ELISA的实验,检测一个Fc受体CD16和一个细胞因子受体TNFR与抗体Fc融合蛋白的亲和力。具体方案不知该怎么选择。大家给提提意见。
首先包被时候是选择CD16直接包被还是用CD16的抗体后在结合CD16呢?
其次,包被后封闭的时候封闭液有加BSA,有加海藻糖,有加明胶,这个选择有什么讲究么?我该如何选择呢?
而后我计划加入融合蛋白,在通过HRP偶联的TNFR的抗体结合,TMB显色。
我的计划是否可行呢?该如何选择呢?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看英文文献看大家怎么做的然后加以选择,文献应该有很多。
4楼2012-11-28 16:57:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

【答案】应助回帖

测定亲和力有专门的文献参考的,不是很难,中文和英文方面都有相关文献;你说的ELISA封闭问题其实你想复杂了,只要能达到封闭效果就可以了呀,一般1%的BSA或5%的milk都可以的,但是如果你想仔细的摸索出最好的封闭液组合倒是另外一回事了;你的计划是属于一般ELISA的步骤,往下做做看就好了。ELISA挺成熟也挺简单的。希望对你有用。
Orbetterit,orenjoyit!
2楼2012-10-10 12:15:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq:858200882

【答案】应助回帖

问题不够明朗,过于庞大,建议写下你的思路,问题逐个讨论分析!
本公司专业从事蛋白纯化,抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq:858200882
3楼2012-11-28 11:43:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haodanfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用CD16的抗体包被,用0.1%的BSA封闭,之后加融合蛋白,再通过HRP偶联的TNFR的抗体结合,TMB显色。
5楼2013-01-14 12:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 各位老师好,我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +5 Koxui 2026-03-28 5/250 2026-03-28 22:08 by 运气yunqi
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +6 leaflight 2026-03-24 6/300 2026-03-28 21:45 by sanrepian
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学材料与化工方向336分 +8 辰沐5211314 2026-03-26 8/400 2026-03-28 11:25 by xuxiang
[考研] 材料求调剂一志愿哈工大324 +7 闫旭东 2026-03-28 9/450 2026-03-28 08:51 by Xu de nuo
[考研] 材料与化工考研调剂 +17 孅華 2026-03-22 17/850 2026-03-28 08:35 by WYUMater
[考研] 311求调剂 +3 希望上岸阿小杨 2026-03-23 3/150 2026-03-28 07:57 by 热情沙漠
[考研] 085404求调剂,总分309,本科经历较为丰富 +4 来财aa 2026-03-25 4/200 2026-03-28 07:41 by 棒棒球手
[考研] 086502化学工程342求调剂 +6 阿姨复古不过 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:06 by wangy0907
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 0703化学338求调剂! +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +5 SYA! 2026-03-23 5/250 2026-03-27 09:29 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 324求调剂 +8 hanamiko 2026-03-26 10/500 2026-03-27 08:06 by hypershenger
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
信息提示
请填处理意见