24小时热门版块排行榜    

查看: 1170  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sutol329

新虫 (初入文坛)

[求助] ELISA的一些小疑问

最近刚开始准备设计做一个ELISA的实验,检测一个Fc受体CD16和一个细胞因子受体TNFR与抗体Fc融合蛋白的亲和力。具体方案不知该怎么选择。大家给提提意见。
首先包被时候是选择CD16直接包被还是用CD16的抗体后在结合CD16呢?
其次,包被后封闭的时候封闭液有加BSA,有加海藻糖,有加明胶,这个选择有什么讲究么?我该如何选择呢?
而后我计划加入融合蛋白,在通过HRP偶联的TNFR的抗体结合,TMB显色。
我的计划是否可行呢?该如何选择呢?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq:858200882

【答案】应助回帖

问题不够明朗,过于庞大,建议写下你的思路,问题逐个讨论分析!
本公司专业从事蛋白纯化,抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq:858200882
3楼2012-11-28 11:43:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

jfj_tj

木虫 (正式写手)

免疫学兴趣家

【答案】应助回帖

测定亲和力有专门的文献参考的,不是很难,中文和英文方面都有相关文献;你说的ELISA封闭问题其实你想复杂了,只要能达到封闭效果就可以了呀,一般1%的BSA或5%的milk都可以的,但是如果你想仔细的摸索出最好的封闭液组合倒是另外一回事了;你的计划是属于一般ELISA的步骤,往下做做看就好了。ELISA挺成熟也挺简单的。希望对你有用。
Orbetterit,orenjoyit!
2楼2012-10-10 12:15:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看英文文献看大家怎么做的然后加以选择,文献应该有很多。
4楼2012-11-28 16:57:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haodanfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用CD16的抗体包被,用0.1%的BSA封闭,之后加融合蛋白,再通过HRP偶联的TNFR的抗体结合,TMB显色。
5楼2013-01-14 12:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +10 枫桥ZL 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:02 by peike
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 287求调剂 +7 晨昏线与星海 2026-03-19 8/400 2026-03-20 22:19 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
信息提示
请填处理意见