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简单HE认真

木虫 (小有名气)

[求助] 如何有效的提高菌体表达量?

在大肠杆菌表达蛋白的实验中,每次诱导收菌后定位看表达量都很少,请教高手如何可以有效的提高菌体表达量?
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简单做人,认真做事。
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dongniaoxin

铁杆木虫 (正式写手)

响当当的木头

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
试试更换载体或者优化培养基
没有梦就走,没有错就不向谁低头
2楼2012-09-22 11:55:11
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tvriq8330

银虫 (初入文坛)

提高质粒拷贝数,诱导时间延长,低温诱导过夜试试
生命从无到有,无乃万有!
3楼2012-09-23 19:25:02
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lihao1988903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

寻找合适的诱导时机,诱导剂的量,诱导时间等,实在不行的话重新构建载体或者转化一下试试。
4楼2012-09-28 09:18:27
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简单HE认真

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dongniaoxin at 2012-09-22 11:55:11
试试更换载体或者优化培养基

如何优化培养基呢?
简单做人,认真做事。
5楼2012-09-28 10:38:08
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houchm0927

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-28 14:44:29
楼主问题太大了。优化培养基,适当提高培养基营养量,选择合适菌株,菌株对数期时诱导,高拷贝表达质粒,低温诱导过夜等等。如果要认真做,那就小样诱导,改变变量,摸索条件吧。我们有时也是10L一次的纯化的。
6楼2012-09-28 11:00:06
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