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如何有效的提高菌体表达量?
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如何有效的提高菌体表达量?
在大肠杆菌表达蛋白的实验中,每次诱导收菌后定位看表达量都很少,请教高手如何可以有效的提高菌体表达量?
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简单做人,认真做事。
1楼
2012-09-21 12:53:07
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dongniaoxin
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
试试更换载体或者优化培养基
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没有梦就走,没有错就不向谁低头
2楼
2012-09-22 11:55:11
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专业: 微生物学
提高质粒拷贝数,诱导时间延长,低温诱导过夜试试
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生命从无到有,无乃万有!
3楼
2012-09-23 19:25:02
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lihao1988903
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专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
寻找合适的诱导时机,诱导剂的量,诱导时间等,实在不行的话重新构建载体或者转化一下试试。
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4楼
2012-09-28 09:18:27
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专业: 生物化学
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
dongniaoxin
at 2012-09-22 11:55:11
试试更换载体或者优化培养基
如何优化培养基呢?
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简单做人,认真做事。
5楼
2012-09-28 10:38:08
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houchm0927
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专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流
2012-09-28 14:44:29
楼主问题太大了。优化培养基,适当提高培养基营养量,选择合适菌株,菌株对数期时诱导,高拷贝表达质粒,低温诱导过夜等等。如果要认真做,那就小样诱导,改变变量,摸索条件吧。我们有时也是10L一次的纯化的。
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6楼
2012-09-28 11:00:06
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