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静音0108

银虫 (初入文坛)

[求助] 做双酶切 跑胶后什么都没有 是怎么回事?

众位虫子们  帮帮忙啊  谁遇到过这种状况  
质粒和DNA片段做双酶切后  跑胶后什么都没有  一片空白。用于酶切的质粒和片段在酶切前跑胶是有条带的 ,为何切后什么都没了?我37℃酶切了7小时,即使是时间过长了 ,也应该有弥散的吧?
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武穆大成

木虫 (著名写手)

笨蛋

【答案】应助回帖

量可能太少了,,胶回收有一定的效率,,最好加洗脱液的量应该不少。相应的浓度就低了。上的样可能没跑出来。,。测下浓度再加相依的量跑试试。。祝好
20楼2013-06-25 09:29:52
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酶切专家

金虫 (小有名气)

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静音0108: 金币+1 2012-11-10 18:42:00
你电泳时有没有酶切的质粒或DNA对照吗?不会是没加EB吧?
2楼2012-09-18 21:57:10
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尚慕寒

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
静音0108: 金币+1 2012-11-10 18:42:13
没带MARKER?完全空白估计是忘记加EB了吧
高山仰止,景行行止,虽不能至,心向往之。
3楼2012-09-18 23:13:02
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无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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静音0108: 金币+1 2012-11-10 18:42:27
你用MARKER,酶切前后产物,一起跑一下。7个小时感觉时间太长了,酶的活性很高,3个小时感觉就可以了
4楼2012-09-18 23:48:57
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