应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 农杆菌培养问题
51/1返回列表
查看: 9535  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

曾经遥远

银虫 (正式写手)

[求助] 农杆菌培养问题

最近在做农杆菌培养，然后要做菌液pcr，这个菌是学长构建好了载体才给偶的。可是现在它有杂菌了，所以偶又重新画平板纯化。可是可是，偶真真的是菜鸟一个，遇到了两个问题，还请各位大侠支招，
  问题一：我加的抗生素有利福平，可是不知道该怎么配利福平母液好？
  问题二：农杆菌划平板后的培养温度是多少？是不是不能超过28°c？偶昨晚划的平板就直接放在37°c培养了，是不是都死了？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
选择了就不要放弃
1楼 2012-09-17 21:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
曾经遥远: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-09-18 00:24:27
关于利福平配置，我是用DMSO配成50 mg/ml储配液，分装在2 ml EP管内，-20度保存，使用时按每升加1 ml使用。农杆菌一般培养温度在28-30度之间，我以前也搞错过，液体培养37度摇了一夜，结果农杆菌根本不生长。
赞一下(1人) 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
5楼2012-09-17 23:21:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
曾经遥远: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-09-17 21:50:08
嗯.......................
      1. 第一个问题我忘了怎么配了 你最好问问配过的师兄师姐 好像Rif很麻烦 如果嫌麻烦 而且你用的是GV3101株系 直接用Gen+你质粒上的抗性来筛就足够了
       重点是回答你第二个问题 这个是个很重要的问题
       2. 37度农杆菌当然不会死 还活的的好好的 但是高温培养会丢失Ti质粒 似乎3~6个小时培养就会全部丢失 所以农杆菌一般是低温培养保证有选择压力使Ti质粒保存下来 若你Ti质粒都丢失了 你怎么转都不成功的
       个人看法 若有说错请高手指正
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
2楼2012-09-17 21:34:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

曾经遥远

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-09-17 21:34:13
嗯.......................
      1. 第一个问题我忘了怎么配了 你最好问问配过的师兄师姐 好像Rif很麻烦 如果嫌麻烦 而且你用的是GV3101株系 直接用Gen+你质粒上的抗性来筛就足够了
       重点是回答你第二个问 ...

你怎么知道是GV3101株系 ？我不是很懂呢。Gen是什么？
赞一下(1人) 回复此楼
选择了就不要放弃
3楼2012-09-17 21:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
嗯..............
       大姐啊 你做植物的 农杆菌株系就那么几种 看你还用Rif 估计就是GV3101了
       Gen是Gentamicin（庆大霉素）的简写  非常好配 而且是少数可以高压灭菌的抗生素之一
       老话 嫌麻烦就只用双抗性 Gen+你表达载体抗性 但用Rif+Gen+载体抗性更保险些
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
4楼2012-09-17 22:20:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +6 Isak0320 2026-10-12 8/400 2026-10-12 20:09 by caixiaoye1
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +4 wangyl_123 2026-10-10 8/400 2026-10-12 18:09 by wangyl_123
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +3 好运来～9527 2026-10-10 6/300 2026-10-12 14:55 by 简单化xn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭