| 查看: 2291 | 回复: 5 | |||
changes木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】求分享叶盘法根癌农杆菌农杆菌介导的烟草转化体系 已有1人参与
|
|
求大家分享。做这个好几批了，可是长的都不好，没有获得抗性株，抗性芽一移栽就死了，也不知是抗性芽为假阳性还是培养基出了问题，亦或是筛选比较不对？ 我们用的是pCAMBIA1301载体，潮霉素筛选的。 大家有比较成熟的烟草转化体系请分享下吧。越详细越好， 1.所用的质粒、筛选用抗生素？ 2.叶盘大小，叶盘部位选择，愈伤组织培养的培养基配方、培养天数、温度、光周期？ 3.农杆菌的浓度（OD值达到多少？），侵染液配方、pH值、侵染时间？ 4.共培养条件、时间，所用培养基？ 5.分化培养的培养基、温度、光周期、大约多长时间能长出抗性芽？农杆菌如何抑制？ 6.抗性芽长至多大时转至生根培养基？如何分离抗性芽、直接用镊子夹下吗？生根培养基配方？ 谢谢大家，实在是没辙了。我在北京，我们实验室以前没做过这些，现在做起来太费劲了。请大家帮忙。 |
回复此楼» 猜你喜欢
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有277人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 叶盘法时为什么要去除主脉
已经有4人回复
changes
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 3143.5
- 散金: 103
- 红花: 3
- 帖子: 394
- 在线: 255.3小时
- 虫号: 142029
- 注册: 2005-12-21
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
2楼2010-07-21 15:09:25
changes
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 3143.5
- 散金: 103
- 红花: 3
- 帖子: 394
- 在线: 255.3小时
- 虫号: 142029
- 注册: 2005-12-21
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
3楼2010-07-28 10:39:12
changes
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 3143.5
- 散金: 103
- 红花: 3
- 帖子: 394
- 在线: 255.3小时
- 虫号: 142029
- 注册: 2005-12-21
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
4楼2010-08-18 16:24:33
5楼2016-02-26 19:29:18
Neo2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 639 (博士)
- 金币: 8720.2
- 红花: 37
- 帖子: 1700
- 在线: 269.3小时
- 虫号: 322365
- 注册: 2007-03-11
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
6楼2016-02-26 19:56:21
