24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1986  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

changes

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求分享叶盘法根癌农杆菌农杆菌介导的烟草转化体系 已有1人参与

求大家分享。做这个好几批了,可是长的都不好,没有获得抗性株,抗性芽一移栽就死了,也不知是抗性芽为假阳性还是培养基出了问题,亦或是筛选比较不对?
我们用的是pCAMBIA1301载体,潮霉素筛选的。
大家有比较成熟的烟草转化体系请分享下吧。越详细越好,
1.所用的质粒、筛选用抗生素?
2.叶盘大小,叶盘部位选择,愈伤组织培养的培养基配方、培养天数、温度、光周期?
3.农杆菌的浓度(OD值达到多少?),侵染液配方、pH值、侵染时间?
4.共培养条件、时间,所用培养基?
5.分化培养的培养基、温度、光周期、大约多长时间能长出抗性芽?农杆菌如何抑制?
6.抗性芽长至多大时转至生根培养基?如何分离抗性芽、直接用镊子夹下吗?生根培养基配方?
谢谢大家,实在是没辙了。我在北京,我们实验室以前没做过这些,现在做起来太费劲了。请大家帮忙。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

changes

木虫 (正式写手)

再来看看,大家都放假了吗?怎么没人做这方面的呢。
4楼2010-08-18 16:24:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

changes

木虫 (正式写手)

现在做这方面的不多吗,还是都没空来小木虫啊,亦或是不屑回答此类问题,不可能大家还保密吧?静候佳音。
2楼2010-07-21 15:09:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

changes

木虫 (正式写手)

还没有回复的吗?怎么了?真的没人做还是这个事情大家保密还是不屑一提呀。
3楼2010-07-28 10:39:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晒太阳的曼巴

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by changes at 2010-08-18 16:24:33
再来看看,大家都放假了吗?怎么没人做这方面的呢。

请问楼主现在能不能帮我解答一下这方面的问题啊?
5楼2016-02-26 19:29:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学求调剂 +20 不知名的小卅 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 10:50 by 猪会飞
[考研] 070300化学279求调剂 +17 哈哈哈^_^ 2026-04-08 18/900 2026-04-09 10:49 by 三七七想上岸
[考研] 0703总分331求调剂 +18 ZY-05 2026-04-04 22/1100 2026-04-09 09:09 by 哦哦123
[考研] 293调剂 +21 yj1221 2026-04-08 22/1100 2026-04-09 08:34 by 5268321
[考研] 318求调剂 +13 ykyhsa 2026-04-05 15/750 2026-04-08 21:37 by wj165256
[考研] 化工学硕 285求调剂 +26 Wisjxn 2026-04-07 26/1300 2026-04-08 14:42 by screening
[考研] 22408 266求调剂 +11 masss11222 2026-04-07 14/700 2026-04-08 11:06 by yulian1987
[考研] 计算机408|在校多次国家级竞赛获奖|申请调剂 +4 东山大白鹅 2026-04-05 4/200 2026-04-08 00:18 by chongya
[考研] 085602调剂 初试总分335 +10 19123253302 2026-04-05 10/500 2026-04-07 15:23 by 小乔同学ya
[考研] 22408 318分求调剂 +4 勤奋的小笼包 2026-04-06 6/300 2026-04-07 15:05 by 纸鹤555
[考研] 316求调剂 +7 yyx想调剂 2026-04-05 7/350 2026-04-07 14:31 by shdgaomin
[考研] 312求调剂 +4 LR6 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:42 by jp9609
[考研] 085405软件工程301分求调剂,专硕可跨专业,四六级已过 +3 静静想想 2026-04-05 3/150 2026-04-06 15:23 by nepu_uu
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +5 李rien 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:30 by zhyzzh
[考研] 化学357分,考研调剂 +11 .Starry. 2026-04-04 12/600 2026-04-06 06:28 by houyaoxu
[考研] 22408 总分320,一篇论文二作,两个国三,求调剂 +3 Leomulufu 2026-04-04 5/250 2026-04-05 19:04 by chongya
[考研] 295求调剂 +8 FZAC123 2026-04-03 8/400 2026-04-05 17:46 by 蓝云思雨
[考研] 333求调剂 +12 wfh030413@ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:02 by jj987
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
信息提示
请填处理意见