应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » RT-PCR时GAPDH条带不一样，目的条带呈涂抹的模糊带如何改进~~
51/1返回列表
查看: 1531  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

马龙sweeting

木虫 (正式写手)

[交流] RT-PCR时GAPDH条带不一样，目的条带呈涂抹的模糊带如何改进~~

最近在做RT-PCR，可是总是发现GAPDH跑出来不一样~~有时候跑得更是一个有一个没有，请问这是怎么回事~~如何改进呢~~
还有我的目的条带总是出现涂抹状的模糊带，看上去有东西，但是不知道如何改进才行~~请各位高手帮帮忙~~谢谢~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-09-07 11:12:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
您好，您遇到的问题我现在也遇到了，我想问一下您是怎么解决的？？能方便留一下您的邮箱或者是qq号吗？？实验做得太让人头疼了！
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2012-10-27 23:24:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

geek23

木虫 (小有名气)
★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
建议楼主详述PCR 条件,最好附个结果图啥的~
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-09-07 16:07:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
wizardfan: 金币+2, 回答地很详细 2012-09-09 07:36:08
RT-PCR影响因素多了，最主要的还是原料-RNA质量要好，包括浓度以及完整性，这个最好通过RNA变性胶结合OD260/OD280判断；其次操作过程中的试剂质量要有保障，主要是反转酶以及聚合酶；再次实验过程中的个人操作规范问题，例如移液器加样准确否，有时候打完液体后靠一下EP管壁有时候不靠可能就会产生误差，有时候tip里面的液体打不干净影响更大；最后还是仪器的稳定性，特别是控温等；当然还有很关键的就是引物特异性问题等。总之RT-PCR的影响因素很多，出了问题要一个一个的回查。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2012-09-08 10:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭